可能有的童鞋对PCR不屑一顾,“啥？PCR？不就是Polymerase Chain Reaction,不就是聚合酶链式反应嘛,什么巢氏PCR、Q-PCR,哥都做过,so easy！”,其实PCR也有很多拓展应用,上面的几个只是其中之一而已。(文章最后的选择题,你敢选吗？)

老生常谈,也为了照顾一下可能对PCR只知道皮毛的童鞋,咱们从PCR的祖坟开始刨。

PCR能够在体外进行DNA复制,微量的DNA经过PCR扩增后,DNA片段的量将大幅增加。无论是化石中的古生物、历史人物的残骸,还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液,只要能分离出一丁点的DNA,就能用PCR加以放大。这也是“微量证据”的威力之所在。

PCR的过程中目的DNA片段的增加数量符合以下理论公式：

(Y：目的DNA片段总数)

那么为什么是这样计算呢？PCR的原理童鞋们可以直接点击视频观看,更加形象生动,比X师兄打字儿强多了。

最后有一道选择题，不造你敢不敢做，请听题：

题目：小明要做PCR实验，但是由于粗心，PCR体系中只加了上游引物，忘了下游引物，假设DNA模板起始数有50个，程序设置了跑30cycles，10轮反应过后，体系中共有多少条目的DNA片段（不含模板！）

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中国科学院研究生院2001年硕士研究生入学考试

科目名称：生物化学与分子生物学（无答案）

一.是非题（1X10）

1. 所有a氨基酸中的a碳原子都是一个不对称的碳原子（）

2. 蛋白质的四级结构可以定义为一些特定的三级结构的肽链通过共价键形成的大分子体系的组合（）

3. 根据凝胶过滤层析的原理，分子量愈小的物质，因为愈容易通过，所以最先被洗脱出来（）

4. 两个或几个二级结构单元被连接多肽连接在一起，组成有特殊的几何排列的局部空间结构，这样的结构称为超二级结构，有称为模体（MOTIF）（）

5. 抑制剂不与底物竞争酶结合部位，则不会表现为竞争性抑制（）

6. 酶反应最适PH不仅取决于酶分子的解离情况，同时也取决于底物分子的解离情况（）

7. 寡聚酶一般是指由多个相同亚基组成的酶分子（）

8. 糖异生途径是由相同的一批酶催化的糖酵解途径的逆转（）

9. 线粒体内膜ADP-A TP载体蛋白在促进ADP由细胞质进入完整线粒体基质的同时A TP由完整线粒体基质进入细胞质的过程是需要能量的（）

10. 脂质体的直径可以小到150 ？（）

11. 质膜上糖蛋白的糖基都位于膜的外侧（）

12. 雄性激素在机体内可变为雌性激素（）

13. CoA，NAD和FAD等辅酶中都含有腺苷酸部分（）

14. 黄嘌呤氧化酶的底物是黄嘌呤，也可以是次黄嘌呤（）

15. RNA连接酶和DNA连接酶的催化连接反应都需要模板（）

16. DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反应都需要引物（）

18. 在细菌中RNA聚合酶和核糖体蛋白质的合成由共同的调节系统（）

19. 所有氨酰-t RNA合成酶的作用都是把氨基酸连接在Trna末端核糖的3'-羟基上（）

20. 核小体中的核心组蛋白在细胞活动过程中都不会被化学修饰（）

二.选择题（1x25）

B. 脂肪酸衍生物激素

3.肌球蛋白分子具有下述哪一种酶的活力____________

4.神经生长因子（NGF）的活性分子由下列肽链组成________

5.胰岛素原是由一条“连接肽”通过碱性氨基酸残基连接其他二条链的C端和N端，这条“连接肽”称为_________

6.米氏方程双到数作图的总轴截距所对应的动力学常数为___________

7.磷酸化酶激酶催化磷酸化酶的磷酸化，导致该酶__________________

A. 由低活性形式变为高活性形式

B. 由高活性形式变为低活性形式

8.底物引进一个基团以后，引起酶与底物结合能增加，此时酶催化反应速度增大，是由于______

B. 增加的结合能被用来降低反应活化能

C. 增加的结合能被用来降低Km

D. 增加的结合能被用来增大Km

C. 丝氨酸/苏氨酸激酶

10.2000年诺贝尔生理学或医学奖予下列哪一个领域的重大贡献有关：_______________

D. 线粒体呼吸链还原辅酶Q-细胞色素c氧化还原酶

12.膜固有蛋白与膜脂的相互作用主要通过__________

A. 磷脂双层两侧各附着不同蛋白质

B. 磷脂形成片层结构，蛋白质位于各个片层之间

C. 蛋白质为骨架，二层磷脂分别附着与蛋白质的两侧

D. 磷脂双层为骨架，蛋白质附着于表面或插入磷脂双层中

B. 电子传递链的载体

C. 琥珀酸脱氢酶的辅基

17.一段寡聚合糖核苷酸TψCGm1Acmm5CC，其中含有几个修饰碱基（非修饰核苷）：

19.别嘌呤醇可用于治疗痛风症，因为它是____________

A. 鸟嘌呤脱氨酶的抑制剂，减少尿酸的生成

B. 黄嘌呤氧化酶的抑制剂，减少尿酸的生成

C. 尿酸氧化酶的激活剂，加速尿酸的降解

21. 在核糖体上进行蛋白质合成，除了肽链形成本身以外的每一个步骤都与什么有关？

D. 烟酰胺核苷酸参与

22. 基因重组就是DNA分子之间的：

23. DNA复制过程中双链的解开，主要靠什么作用__________

24. 包括中国在内，有很多国家科学家参与的人类基因组计划，到目前为止的进展情况如何？

A. 仅完成23对染色体的遗传图谱和物理图谱

B. 仅测定了7、10和22号染色体的核苷酸序列

C. 测定了人基因组3X10^9碱基的全序列，但只是一部“天书”，无法知道它的全部意义

D. 测定了人基因组全序列，分析了他们代表的遗传信息，已经了解大部分基因的功能

25. 催化转氨作用的转氨酶所含的辅基是：________

三.填空题（每空一分）

1. 胰岛素最初合成的单链多肽称为________，然后是胰岛素的前体，称为_________。

2. 原胶原蛋白分子的二级结构是一种三股螺旋，这是一种_________结构，其中每一股又是一种特殊__________结构。

3. 有一类不可逆抑制剂具有被酶激活的性质，被称为_________型不可逆抑制剂，又可被称作酶__________

5. 蛋白激酶A的专一活化因子是Camp，蛋白激酶C的专一活化因子是__________，此外还有某类型的蛋白激酶可以由_______作为专一激活因子。

8. 线粒体内膜催化氧化磷酸化合成A TP的F1F0酶的F1部分的亚基组成的结构是__________

9. 除了膜脂脂肪酰链的长度外，影响膜脂流动性的主要因素是_____________

10. 左旋的Z-DNA与右旋的B-DNA相比，前者的每对核苷酸之间的轴向距离_________于后者；前者的直径________于后者。

11. 已知二类核糖体失活蛋白（RIP）都是通过破坏核糖体大亚基RNA而使核糖体失活，这二类蛋白质分别具有___________和____________活性。

14. 逆转录病毒含有单链RNA，感染细胞后转变成双链DNA，这种DNA必须_________，才能发生病毒的复制。

15. 真核RNA聚合酶I主要位于细胞__________中，合成大分子核糖体RNA前体。

1. 蛋白质化学测序法的原则和程序可归纳为哪5个阶段？（仅需写出阶段名称）

2. 在酶的醇化过程中必须考虑尽量减少酶活性的损失，因此操作过程通常要求在低温下进行。如果醇化一个热稳定（耐温）的酶，是否不需要在低温条件下操作？请简述你的见解。

3. 由一个抑制剂抑制完整线粒体β-羟基丁酸或琥珀酸的氧化，但不抑制（维生素C+四甲基对苯二胺）的氧化，这个抑制剂的抑制部位应该在电子传递链的什么部位？为什么？

4. 简述RNA剪接和蛋白质剪接。

5. 酵母细胞利用半乳糖的几种酶基因GAL7-GAL10-GAL1，它们的转录是如何受调控因子GAL4和GAL80调节的？

中国科学院研究生院2002年硕士研究生入学考试

科目名称：生物化学与分子生物学

一、是非题：15题，每题1分，共15分。答"是"写"+"，答"非"写"- "，写在题后的（）中。

1．维生素对人体的生长和健康是必需的，但人体不能合成维生素。（）

2．能被某种振奋分子识别，并与其特异和共价结合的原子，原子团和分子，称为配基。（）

3．当不同分子大小的蛋白质混合物流经凝胶柱层析时，小分子物质因体积小最先被洗脱出来。（）4．酶的最适pH与酶的等电点是两个不同的概念，但两者之间有相关性，两值通常比较接近或相同。（）5．对于一个酶而言，其过渡态的底物类似物与底物的物相比较，是更有效的竞争性抑制剂。（）6．Km值是酶的牲常数之一，与酶浓度、pH值、离子强度等条件或因素无关。（）

7．磷脂酶A水解脂生成磷脂酸。（）

8．NAD 不能由细胞浆通过线粒体内膜进入线柆体内，而NADH能在通过线粒体内膜后被氧化。（）9．寡霉素是线粒体A TP合成酶的抑制剂。（）

10．核苷磷酸化酶催化腺苷的磷酸化，生成腺嘌呤和核糖-5-磷酸。（）

13．肾上腺素能与细胞膜上专一受体结合，这种激素受体复合物能直接活化环化酶，使细胞cAMP浓度增加，引起级联反应。（）

14．维生素E是一种抗氧化剂，对线体膜上的磷脂有抗自由的作用。（）

15．吡哆醛、吡哆胺和吡哆醇的磷酸酯都可以作为转氨的辅酶。（）

二、选择题：20题，每题1分，共20分。请将选择答案的号码填入（）中。

1．为稳定胶原三股螺旋结构，三联体的每三个氨基酸的位置必须是：（）

①丙氨酸；②谷氨酸；③甘氨酸

2．分离含胡二硫键的肽段可以用：（）

①SDS-PAGE电泳；②对角线电泳；③琼脂糖电泳

3．引起疯牛病（牛海绵脑病）的病原体是：（）

①一种DNA；②一种RNA；③一种蛋白质；④一种多糖

4．胰岛素等激素的受体以及上成或表皮生长因子的受体都是一种：（）

①激酶；②脱氢酶；③转氨酶

5．在酶的可逆抑制剂中，不影响酶的二级常数（Kcat/Km）的是：（）

①竞争性抑制剂；②非竞争性抑制剂；③反竞争性抑制剂；④都不是

6．“多酶体系”是指一个代谢过程中几个酶殗了一个反应链体系，多酶体系中的酶通常具有以下性质。（）

①只是在功能上相互有联系，在结构上互不相关，不存在相互作用；

②不仅在功能上相互有联系，在结构上也有相互联系，形成复合体；

③上述两种情况都存在。

7．所谓“代谢物”指的是下面哪一条？（）

①特指代谢反应中的反应物；②特指代谢反应中的产物；

③特指代谢反应中的中间物；④所有代谢反应中的反应物、中间物和产物都称为代谢物。

8．有的酶存在多种同工酶形式，这些同工酶所催化的反应：（）

①并不完全相同；②完全相同，而且反应的平衡常数也相同；

③完全相同，但由于每种同工酶活性不同，反应平衡常数可以不相同。

9．脂肪肝是一种代谢疾病，它的产生主要是由于：（）

①肝脏脂肪水解代谢障碍；②肝脏蛋白不能及时将肝细胞脂肪排出；

③肝脏细胞摄取过多游离脂肪酸；④肝脏细胞膜脂肪酸载体异常

10．线粒体A TP/ADP交换载体在细胞内的作用是：（）

①需能传送；②促进传送；③ A TP、ADP的通道；④ A TP水解酶

11．辅酶Q是线粒体内膜：（）

① NADH脱氢酶的辅酶；②琥珀酸脱氢酶的辅酶；

③二羧酸载体；④呼吸链的氢载体

12．线粒体蛋白的跨膜传送是一种：（）

①类似细胞膜的吞噬作用；②蛋白质解折叠后传送；

③通过对各个蛋白质专一的载体传送；④膜内外同类蛋白质交换

14．反密码子为IGC，可识别密码子：（）

15．RNA形成二级结构的碱基对，除了A-U和G-C外，还有：（）

16．RNA用强碱水解，产生：（）

① 2'和5'核苷酸混合物；② 2'和3'核苷酸混合物；③ 3'和5'核苷酸混合物；

17．能与受体结合，形成激素受体复合物，进入细胞核调节基因表达的激素是：（）

①甲状腺素②肾上腺素；③溏皮质激素；④前列腺素

18．原核生物基因转终止子在终止点前均有：（）

①回文结构；②多聚A序列；③ TATA序列；④多聚T序列

19．能专门水解DNA RNA杂交分子中RNA的酶是（）

① DNA聚合酶I；②逆转录酶；③ Rnase A；④核酸外切酶III

20．真核生物中，存在于核仁中的RNA聚合酶是：（）

三、填空题：9题，每空格答对1分，共15分

1．已知三种超二级结构的基本组合形式______，______，______。

2．Western印迹法的原理是用______鉴定蛋白质的一种方法。

3．酶容易失活，如何保存酶制品是一个很重要的问题。通常酶制品的保存方法有______和______等。4．红细胞膜带3蛋白是一种______。

6．细胞核内除了DNA外，还发现至少有二类小分子RNA，它们是核小分子RNA和________。7．核酸变性时，紫上吸收值增高，叫________效应。

8．限制性内切酶特异识别和切割DNA分子中的回文结构，形成末端有粘性末端和________末端。