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【求助】免疫荧光做的很蛋疼，求大神指导哪里出问题了？？？
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这个帖子发布于2年零54天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
想请教各位大神，想OLympus IX71倒置相差荧光显微镜中有U、B、G三种色光，本人想用激发光为492nm的绿色荧光二抗进行免疫荧光，在此三种色光下都没有表现出明显的绿色光，反而在U下显示出和DAPI相似的色光，而换用dylight649红色荧光二抗后，结果类似，在这三种色光下，似乎只有绿色光通道能见到红色，但是像DAPI也同样显示出红色的，所以感觉没有什么特异性的，不知道这台显微镜还有什么使用诀窍没？急求高手帮忙，谢谢！！！！1.绿色光下的红色荧光二抗：（因怀疑荧光二抗的问题，所以是直接取少量二抗液体来拍照的）2.U通道下的红色荧光二抗：3.B通道下的红色荧光二抗：4.以下为紫光下的DAPI+Dylight649:(为什么没有红色)
不知道邀请谁？试试他们
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丁香园助理版主
1、首先你要搞清楚显微镜U、B、G三个通道分别的光谱接收范围是多少？能否与你的染料发射光想匹配？2、你用到了一个647的荧光染料，一般而言这类远红染料普通显微镜下肉眼是无法检测到的，可以用confocal进行观察。3、一般单一的滤镜通道下只能观察一种颜色，所以UV模式下你是看不到红色荧光的。
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qq 1、首先你要搞清楚显微镜U、B、G三个通道分别的光谱接收范围是多少？能否与你的染料发射光想匹配？2、你用到了一个647的荧光染料，一般而言这类远红染料普通显微镜下肉眼是无法检测到的，可以用confocal进行观察。3、一般单一的滤镜通道下只能观察一种颜色，所以UV模式下你是看不到红色荧光的。 1.相匹配的，2.649普通显微镜是无法观察到，但是我用的是应该显微镜，见到很多文章都是可以用荧光显微镜观察，不一定用到confocal的，所以没有试过用confocal,3.严重同意，是本人愚笨，今日再试，因标本放置日久，荧光仅隐约可见，拟天明后再用新的二抗进行实验
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我们可以做免疫荧光免疫化学和免疫荧光技术 （1）石蜡切片的免疫组织化学和免疫荧光 （2）冰冻切片的免疫组织化学和免疫荧光（3）培养细胞的免疫细胞化学和免疫荧光 （4）HE染色 （5）特殊染色（胶原纤维染色、糖原染色、脂肪染色、肌肉组织染色等） 有意向者欢迎咨询和来公司考察。考察费用公司报销！公司网站：
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gahaya 我们可以做免疫荧光免疫化学和免疫荧光技术 （1）石蜡切片的免疫组织化学和免疫荧光 （2）冰冻切片的免疫组织化学和免疫荧光（3）培养细胞的免疫细胞化学和免疫荧光 （4）HE染色 （5）特殊染色（胶原纤维染色、糖原染色、脂肪染色、肌肉组织染色等） 有意向者欢迎咨询和来公司考察。考察费用公司报销！公司网站：
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多谢了，暂无意向
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我最近也在做细胞免疫荧光，可以一起交流一下。看到你用DAPI染的细胞核应该问题不大，我觉得dylight649激发光和发射光波长和cy5差不多，这个荧光波长在普通的荧光显微镜下是观察不到的，只有在共聚焦或活细胞平台上可以观察到。我们实验室的显微镜和你的是一个型号的，我观察红色荧光是用cy3染色的，这个可以观察到，而且不易淬灭。。。附件里有常用荧光波长，你可以看一下。
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san000 我最近也在做细胞免疫荧光，可以一起交流一下。看到你用DAPI染的细胞核应该问题不大，我觉得dylight649激发光和发射光波长和cy5差不多，这个荧光波长在普通的荧光显微镜下是观察不到的，只有在共聚焦或活细胞平台上可以观察到。我们实验室的显微镜和你的是一个型号的，我观察红色荧光是用cy3染色的，这个可以观察到，而且不易淬灭。。。附件里有常用荧光波长，你可以看一下。敢问阁下，贵实验室所用的荧光染料什么价位的？之前是用FITC绿色荧光的（Absorption peak 492,Emission peak 520），不知道贵实验室的仪器能否看到啊？
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简单来说紫外激发蓝光，蓝光激发绿光，绿光激发红光。紫外能量最强，可激发绿光和红光，照射时间长还可以淬灭，所以一般若有两种以上荧光的实验，先观察长波长光，从红至蓝，荧光淬灭后再观察短波长光。
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Jimmy0909 简单来说紫外激发蓝光，蓝光激发绿光，绿光激发红光。紫外能量最强，可激发绿光和红光，照射时间长还可以淬灭，所以一般若有两种以上荧光的实验，先观察长波长光，从红至蓝，荧光淬灭后再观察短波长光。 多谢兄弟赐教
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请问，olympus ix71 能看到Alexa Fluor 594吗？
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还有就是，二抗买什么品牌的好呢？
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关于丁香园塔罗牌加成幻影吗？_崩坏学园2吧_百度贴吧
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塔罗牌加成幻影吗？
幻影一破，还有1660碎片
rt 按理说，金币够了，...
第一接触塔罗牌是看我朋...
不想玩了，出。诚心要的...
嗯呐 蛮准的。周二选人。
首先，楼主这次不是水贴...
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垃圾屋出c枪不知道换不换，我是狗牙教的
先来整合可以加成C枪()的装备...有漏的在这层回复补充一下吧徽章:(无面者)(领域崩坏)(-闇)(塔耳塔洛斯的囚徒)(雷鸣之心)(新生校章)(旧印)(火焰灼热之灵)(阿萨辛的教条)(英灵杀手)(纳克特抄本)(的)(荧光眷属)(怪异杀手)(的触媒)这三个只加成(毒蛋白结构转置)(自然调和)(五仁月饼)使魔:(暗计时)()衣服:(永恒螺旋)(芬布尔永恒寒冬)武器:(咸鱼炮)
就打打世界boss用。。
楼上错太多了
可以加成，不能日天
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萌新求助，求详解塔罗牌的加成
楼主是个萌新昨天开了60...
既然都说了是整理了就不...
这个随机怎么来的有人获...
推3-4沟了不知道多少次...
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今天刷到塔罗牌了
正在考虑换不换
塔罗牌和战神是相乘还是想加
打世界boss有加成嘛！
塔罗牌值不值？
相乘，有，值
同问，补充一点：塔罗牌和吉他搭配怎样？
远不如领域来的实在
自行车加盟,投资成本低,轻松盈利,小本创业,万元代理.
非常鸡肋的技能80%不上不下
和所有技能相乘～包括幻影
那就是说还不错喽
楼主有吉他是不是该换一个
…我刚换过
说塔罗牌加成不稳定的，你试过血骑士礼装吗
勉强能和战神并肩
塔罗牌还是非常不错的，第一技能是大于等于时都有加成，第二技能在某些时候会救你一命
有犹大调率奏鸣曲领域战神维达海拉么
还不错。我前天换了一个
我的仓库图
还在纠结中，早知道不拿水晶刷一下了
嘛嘛，大佬赶紧来啊
感觉19L说的不错
能把界限换下来了
好多人都刷到塔罗牌了，感觉到了大伟哥深深的阴谋
来个大佬给点建议啊
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