RNA原位杂交怎样检测细胞因子,这个图怎么做出来的?

遗传学大牛公布新RNA检测方法,深入探究细胞RNA的真实情况

  一种名为BOLORAMIS的新RNA检测方法可以设计和使用一种新型的DNA探针,这种探针直接结合其RNA靶标,并允许直接合成条形码DNA扩增子,这种DNA扩增子可以通过荧光原位杂交(FISH)或原位测序进行可视化。与FISSEQ和其他方法相比,BOLORAMIS能够对不同种类的rna进行更高的特异性和敏感性的分析,适用于细胞和组织,并且可以高度复用。

图片:研究人员将BOLORAMIS方法与RNA定位研究的通用标准smFISH分析方法进行了比较

来源:哈佛大学Wyss研究所

一般来说,人类细胞通常会将大约2万个基因中的一半转录成RNA分子。就像蛋白质一样,这些RNA的功能不仅取决于它们的数量,还取决于它们在每个细胞三维空间中的精确定位。许多RNA分子将基因信息从细胞核传递到分布在细胞质中的蛋白质合成分子(信使RNA或mRNAs)中,其他RNA分子是蛋白质合成机器本身的组成部分,但仍有不同的RNA调节基因及其表达具有有待发现的功能。重要的是,包括癌症和神经系统疾病在内的许多疾病的特征表现为RNA的丰度和分布的变化。

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为了防止RNA酶的污染,大家在制作RNA探针时是如何消除RNA酶污染?
1.  以PCR回收产物为模板这一步,将PCR体系经琼脂糖凝胶电泳,采用上海华舜生物工程有限公司的小量胶回收试剂盒回收cDNA片段。这一步不可能防止RNA酶污染,因为试剂盒本身试剂是进行DNA实验用的产品,肯定不能保证内部没有RNA酶污染。这一步如何消除RNA酶污染?
2.  我标记是用的PCR法,Taq酶就是宝生物的E-Taq,它应该也是用于DNA的反应,不能保证内部没有RNA酶污染。这一步如何消除RNA酶污染?



在实验前你都要用去rna酶的试剂
和管子枪头,现在你只有用depc处理以下


谢谢zxyapple,能说更具体一些吗?我主要不知道具体去RNA酶的试剂是哪些,在哪买?


就是DEPC你查一下,自己配点


这个我知道,但采用上海华舜生物工程有限公司的小量胶回收试剂盒回收cDNA片段的试剂盒以及宝生物的E-Taq酶极其BUFFER可以保证是去除RNA酶的成分吗?因为标记体系除了DEPC水补充外,模板得用胶回收试剂盒回收的cDNA片段以及E-Taq酶极其BUFFER!


我帮你问问我们实验室的


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