衣壳蛋白酶具有核酸多聚酶活性吗

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摘 要: 目的: 构建人嗜酸性粒细胞来源的神经毒素(hEDN)与乙肝病毒核心蛋白酶(HBVc)之间插入有linker (Gly4Ser)3的融合真核表达载体(该融合蛋白酶即为靶向核糖核酸酶),以优化分子折叠,并将其应用于抑制HBV复制的体外研究. 方法: 以第四军医大学病原生物学教研室已构建的pcDNA3.1(-)/TR为基础. 应用间接免疫荧光法检测pcDNA3.1(-)/TNL在细胞的表达,并应用放免法测定其抗HBV活性. 同时,应用MTT比色法检测细胞的代谢活性. 结果: 成功构建了有linker (Gly4Ser)3介入的hEDN和HBVc真核融合表达载体;并在HepG2.2.15细胞中得到有效表达.

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丙型肝炎病毒(HCV)是引起丙型病毒性肝炎的病毒由于HCV基因组在结构和表型特征上与人黄病毒和瘟病毒相类似,故将其归为黄病毒科HCV

HCV是一种直径30~80nm的球形颗粒,外有脂质外殼、囊膜和棘突结构内有由核心蛋白酶和核酸组成的核衣壳。HCV基因组为单组正链核糖核酸(RNA)全长约9.4kb。基因组两侧分别为5’和3’非编码区中间为开放的阅读框(ORF),编码区从5’端依次为核心蛋白酶区(C)、包膜蛋白酶区(E1、E2/NS1)、非结构蛋白酶区(NS2、NS3、NS4、NS5)5’非编码区对HCV的复制和翻译起调控作用;NS2和NS3具有蛋白酶酶活性,参与病毒多聚蛋白酶前体的切割此外NS3基因区编码螺旋酶和蛋白酶酶,NS3蛋白酶具有强免疫原性可刺激机体產生抗体,参与解旋HCV-RNA分子以协助RNA复制,在临床诊断中有重要价值;NS4的功能尚不清楚;NS5区编码依赖RNA的RNA多聚酶在病毒复制中起重要作用。

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