【摘要】：近年来人工关节无菌松动的预防方法研究倍受关注。本研 究课题探讨药物预防人工关节术后无菌松动的实验依据 目 的 一、研制假体──骨界面模型，模拟囚工关节置换术后假体周围骨 兔分为两组自体对照，左侧胫骨为实验组每只动物于植入IC 后第2、8、15天，将浓度为10~－７M阿伦磷酸钠100μl经皮紸入 假体-骨长入界面；右侧做为对照组在相同的时间给予等量生 理盐水。术后4周假体周围骨组织取材，10只动物标本进行 H.E染色组织学觀察，并用骨组织图像分析系统对两组的成骨 情况进行比较另10只动物标本做生物力学打出实验，观察ALEN 对假体──骨组织结合力的影响 ②、建立破骨细胞体外培养系统：新生24小时以内的Wistar 进行Giemsa、抗酒石酸酸性磷酸酶和甲苯胺蓝染色。采用破骨 细胞连续拍片、图像分析等方法觀察不同浓度的ALEN对破骨 细胞形态、数量的影响；采用丫啶橙方法观察ALEN对破骨细 胞凋亡的影响 三、建立人成骨细胞培养方法：手术中获取疒人的髂骨块， 去除肌肉、骨膜DMEM培养液冲洗松质骨。松质骨块修剪成 1-2mm~3大小消化液（０.4％胶原酶和 0.5％胰蛋白酶 DMEM培 养液个一半体积）中消囮1小时，吸取细胞悬液种于培养瓶中 一、IC模型假体植人兔双侧腔骨近端无不良反应，4周后假 体与周围皮质骨整合皮质骨通过外筒小孔長入与内筒壁形成骨 长入界面，随时间增加小孔中长入的骨组织增加。与对照组相 比10”’M ALEN治疗组成骨率明显增加0＜0．of入 假体最大打 出仂增大o叼刀1入 二、体外培养的破骨细胞含有多个细胞核，具有破骨细胞的 形态特点破骨细胞特异的抗酒石酸酸性磷酸酶染色阳性，与骨 磨片共同培养可以形成被甲苯胺蓝染成兰色的骨吸收窝大于等 于 10－’OM浓度的 ALEN明显降低破骨细胞的活动度和展平面积 0功刀1人－而10“’＊浓喥的AL EN对破骨细胞的展平面积无影 响0＞0刀5人ALEN临床治疗骨质疏松的剂量作用下，盖玻片 上破骨细胞的数量明显减少o功．01人 平均骨吸收窝的面积降 下呈现凋亡形态的细胞明显增多，即细胞核固缩、碎裂、荧光 加深在实验浓度范围内，ALEN的浓度越高凋亡的破骨细胞 越多（P＜O．01）。 三、以人的髓骨松质骨为材料培养所得的成骨细胞具有典型 一、IC模型假体植入手术简单而且可以根据需要将研究因 素在不破坏假体－骨整合的情况下加到骨长入界面。本研究认为 在 10”’OM～10“M浓度之间，ALEN抑制破骨细胞的功能相对 增加成骨，增加骨长人加强假体骨整匼。 二、本课题建立的破骨细胞培养方法可以获得具有功能

【学位授予单位】：军医进修学院
【学位授予年份】：2001