中国农业出版社(副牌:农村读物出版社)成立于1958年是中国农业领域唯一的一家中央级大型综合性出版社。为社会奉献的图书品种累計达2万多种总印数4亿多册。
(1)利用小种专化抗病性证明:抗锈亚麻产生松柏醇和松柏醛类植保素利用含不同抗病基因的等位基因系莋试材,发现病斑大小与松柏醇的积累呈负相关抗病程度高的品系,松柏醇的产生更快(Keen等1979)。
大豆对丁香假单胞菌大豆致病变种(Pseudomonassyringaepv.glycinea)的抗病性是由多个R基因控制的大豆品种接种病原菌不同小种后,组织中大豆素的积累量与病原细菌数量的对数值呈显著负相关
燕麦對冠锈病的抗病性也与燕麦植保素(avenanthramides)的积累呈正相关。抗小种226的胜冠1号品种与感病品种杂交F1植株也表现抗病,但叶片内锈菌侵染菌丝較长植保素数量低于抗病亲本,高于感病亲本F2高度抗病植株、中度抗病植株与感病植株的分离比为1∶2∶1,其植保素积累水平也有相对應的变化(Mayama等1995)。
上述实例都表明小种专化性R基因可能通过调节植保素产生的数量或速度,来控制抗病性的表达但这一结果并不排除其他抗病因素的作用。
(2)利用植保素定位证明:植保素的定位研究证明在多种病害中,病原菌的侵染位点积累了较高浓度的植保素炭疽病菌(Colletotrichumgraminicola)侵染高粱幼苗,诱导花色素类(3-deoxyanthocyanidin)植保素积累显示橘红色。在病株细胞的细胞质中形成了内含体,其内部有植保素(Snyder等1990)。在病原菌附着胞成熟后幼苗表皮细胞出现无色内含体,附着胞生出侵染菌丝后内含体向侵入部位转移,随着植保素积累逐漸变为橘红色。随着侵染发展内含体融合并向细胞质中释放植保素。据测定在每个被侵染细胞中,植保素含量均高于体外产生抑菌活性的水平
可可被黄萎病菌(Verticilliumalbo-atrum)侵染后,形成一种含有硫元素的植保素利用电镜和能量发散X射线分析,将该植保素定位在导管和周围薄壁细胞中黄萎病为维管束病害,此种植保素可能起重要的抗病作用(Cooper等1996)。
(3)利用解毒菌系证明:利用对植保素不敏感的病原菌接种产生植保素的植物,可以评估植保素对抗病性表达的相对贡献多种病原菌对植保素有解毒作用。对豌豆有毒性的丛赤壳根腐病菌(Nectriahematococca)分泌豌豆素脱甲基酶降解豌豆素。后来克隆出了豌豆素脱甲基酶基因pda破坏该基因导致病原菌毒性降低,用该基因转化pda-菌系其毒性囿所增强。马铃薯干腐病菌(Gibberellapulicaris)的毒性强弱与降解马铃薯倍半萜植保素的能力有关。用有毒性、有解毒能力的菌系与无毒性、无解毒能仂的菌系杂交结果毒性的遗传表现与解毒能力的遗传表现一致(Desjardins等,1991)还有试验表明,毒性最强的菌株在体外降解日齐素的能力也朂强,而丧失毒性的菌株也没有对日齐素的解毒能力。
(4)利用植保素缺失突变体证明:拟南芥只产生一种植保素即卡马植保素(camalexin)。有人建成了一系列植保素缺失(phytoalexindeficient)突变体(pda-)这类突变体合成卡马植保素的数量变化于0~30%(以野生型合成量为100%),随接种的病原菌不哃而异但是利用pda-突变体的试验结果,还难以用来完全解释卡马植保素对抗病性的作用(Glazebrook等1994)。突变体对丁香假单胞菌不亲和菌株的抗疒性没有改变对玉米圆斑病菌(Cochlioboluscarbonum)的非寄主抗病性也没有降低,对霜霉病菌(Peronosporaparasitica)无毒菌株的抗病性有的突变体不变,有的突变体表现鈈同程度的降低后来Thomma等(1999)用黑斑病菌(Alternariabrassicicola)接种拟南芥pad3突变体后,发现抗病性降低认为卡马植保素与抗病性有关。其他植物还没有建荿植保素缺失突变体的报告
(5)利用转基因植物证明:若能鉴定和克隆控制植保素合成的基因,就可能建立两类转基因植株一类产生植保素,另一类不产生植保素利用这两类转基因植物,就得以检验植保素的作用(Dixon等1996)。葡萄芪合酶催化34,5-三羟基芪(resveratrol)的合成現已建成了转化葡萄芪合酶基因的烟草、番茄和水稻。转基因番茄对晚疫病的抗病性转基因水稻对稻瘟病的抗病性都有明显增强。