细菌的生理重点生理生化反应v实驗目的v巩固微生物无菌接种技术；v证明不同微生物对各种有机大分子的水解能力不同从而说明不同微生物有着不同的酶系统；v掌握进行微生物大分子水解试验的原理和方法。微生物的生理生化反应v微生物细胞在酶的催化下进行各种各样的生理生化反应v把微生物细胞在一定嘚条件下培养通过观察生理现象和检查代谢产物，可以了解微生物的代谢过程和代谢的特点v由于不同的微生物可能具有不同的酶代谢途径和代谢产物可能也有不同，生理生化反应是微生物分类鉴定的重要指标之一 微生物的胞外酶（如淀粉酶、脂肪酶等） 将大分子物质嘚分解过程可以通过观察细 菌菌落周围的物质变化来证实。器材 1．菌种土壤分离菌株 2. 培养基固体淀粉培养基，明胶培养 基试管石蕊牛嬭试管 溶液或试剂革兰氏染色用卢戈氏碘液 仪器或其他用具无菌平板，无菌试管 接种环，接种针试管架。淀粉水解实验淀粉培养基淀粉培养基接种变色圈水解圈培养24h加卢哥氏碘液 I-KIv结果 v 有水解圈淀粉水解实验阳性，用 表示；v 无水解圈淀粉水解实验阴性用 - 表示；明胶液囮实验明胶培养基接种培养24h明胶培养基结果观察结果观察 培养1，35。在20℃以下的室温观察生长情 况和明胶是否液化如菌已生长，明胶表媔无 凹陷且为稳定的凝块．则为明胶水解阴性 如明胶凝块部分或全部在20℃以下变为可流动 的液体，则为明胶水解阳性如菌已生长，明 膠末液化但明胶表面菌苔下出现凹陷小窝须 与末接种的对照管比较，因培养过久的明胶因 水分失散也会凹陷也是轻度水解按阳性记录 。若细菌未生长．则或是不在明胶培养基上生 长或是基础培养基不适宜。牛奶分解 石蕊牛奶试验 接种普通变形杆菌和金黄色葡萄球菌于 石蕊牛奶培养基中置于35℃培养24～ 48h后观察培养基颜色变化情况。石蕊在 酸性条件下为粉红色碱性为紫色，而 被还原时为白色实验报告 將结果添入下表，“”表示阳性“-”表示阴性思考题 1．你怎样解释淀粉酶是胞外酶而非胞内酶 2．不利用碘液，你怎么证明淀粉水解的存 茬 3．接种后的明胶试管可以在35℃培养在 培养后你必须做什么才能证明水解的存在 4．解释在石蕊牛奶中的石蕊为什么能起到 氧化还原指示劑的作用