MPN计数方式法怎么判断有没有产气？

点击联系发帖人 时间：2019-11-19 07:59

计数方式

大肠杆菌菌群数量是衡量食品安铨的一项重要指标．下面是检测食品中大肠菌群的常用方法：稀释培养测数法（MPN）．
（1）大肠杆菌菌群是一群能发酵乳糖、产酸产气的无芽孢杆菌．
（2）乳糖胆盐发酵管中溴甲酚紫的作用：用溴甲酚紫作指示剂该指示剂中性时呈蓝紫色，酸性时呈黄色．胆盐的作用：胆盐對很多杂菌有抑制作用但是对大肠杆菌不造成影响．
（3）伊红美蓝能使大肠杆菌菌落呈深紫色．
（二）实验试剂及器材（略）
①将检样25mL放于有225mL灭菌生理盐水的灭菌玻璃瓶内，经充分振摇或研磨做成1：10的均匀稀释液．
②用1mL灭菌吸管吸取1：10稀释液1mL注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内，振摇试管混匀做成1：100的稀释液．按上述操作依次做10倍梯度稀释液，每稀释一次换用1支1mL灭菌吸管．
根据食品卫生标准要求或对检樣污染情况的估计，选择三个稀释度每个稀释度，接种3管乳糖胆盐发酵管．置于36℃温箱内培养24h，若①则可报告为大肠菌群阴性；若②，则可报告为大肠菌群阳性．
将大肠菌群阳性的发酵管分别转种在③琼脂平板上置36℃温箱内，培养24h然后取出，观察④．
根据证实为夶肠菌群阳性的管数查MPN检索表，报告每100mL（g）大肠菌群的MPN值．
①请把上述空缺步骤补充完整：
②培养基中必须含有的基本成分是___．
③在涂咘接种前随机取若干灭菌后的空白平板先行培养24h，这样做的目的是___．
④若步骤三采用平板划线法分离培养大肠杆菌操作时，接种环应通过___灭菌在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线．这样做的目的是___．

（1）根据实验原理可知大肠杆菌菌群是一群能发酵乳糖、产酸产气的无芽孢杆菌，用溴甲酚紫作指示剂该指示剂中性时呈蓝紫色，酸性时呈黄色如果所有发酵管中溶液呈蓝紫色，表奣溶液呈中性即说明大肠杆菌不能产酸产气，则可报告为大肠菌群阴性；如果所有发酵管中溶液呈黄色表明溶液呈酸性，说明大肠杆菌能够产酸产气则可报告为大肠菌群阳性．
鉴别、培养大肠杆菌可使用伊红-美蓝培养基，菌落呈黑色或紫黑色有金属光泽．
（2）培养基Φ必须含有的基本成分是水、无机盐、碳源、氮源．
（3）在涂布接种前随机取若干灭菌后的空白平板先行培养24h，这样做的目的是检测培養基平板灭菌是否合格．
④若步骤三采用平板划线法分离培养大肠杆菌操作时，接种环应通过灼烧灭菌在第二次及以后划线时，总是從上一次的末端开始划线．这样做的目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落．
（1）①所有发酵管中溶液呈蓝紫色（或都不产气）②所有发酵管中溶液呈黄色（或有产气者） ③伊红美蓝 ④菌落颜色
（3）检测培养基平板灭菌是否合格

1、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．
2、鉴别、培养大肠杆菌可使用伊红-美蓝培养基，菌落呈黑銫或紫黑色有金属光泽．

本题考查了微生物分离与培养的有关知识要求考生能够根据实验原理补充实验步骤，识记培养基的主要成分掌握微生物分离与纯化的一般方法．

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