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余琪(联系我时，请说明是在中国化工仪器网上看到的，谢谢)
收到细胞的处理方式：收到亮白曲霉细胞时，处理方式为：于寄送过程中，为避免起泡造成细胞脱落死亡，亮白曲霉均加满培养基，请检查亮白曲霉外观，并于显微镜下观察细胞生长状况和有无污染现象，若有任何问题，不要打开盖子，请立即通知细胞实验室，将原封之亮白曲霉静置于37℃，5%CO2培养箱中，使细胞回温至37℃，并让运送过程中少数脱落的细胞可再附着生长，隔天后，于无菌操作箱内取出亮白曲霉内之培养基，（取出之培养基可以再使用），仅留约5-10ml培养基于亮白曲霉内，依一般培养方式再将细胞置入培养箱中，或细胞已长满盘，则将细胞做传代培养。亮白曲霉传代方法根据细胞生长的特点，传代方法有3种：亮白曲霉（1）悬浮生长细胞传代离心法传代：离心（1000转/分）去上清，沉淀物加新培养液后再混匀传代。直接传代法：悬浮细胞沉淀在瓶壁时，将上清培养液去除1/2-2/3，然后用吸管直接吹打形成细胞悬液再传代。亮白曲霉（2）半悬浮生长细胞传代（HeIa细胞）此类细胞部分呈现贴壁生长现象，但贴壁不牢，可用直接吹。打法使细胞从瓶壁脱落下来，进行传代。亮白曲霉（3）贴壁生长细胞传代采用酶消化法传代，常用的消化液有0.25%的胰蛋白酶液。XY1691&& &CSA&& &细胞衰老检测试剂盒&& &Cell Senescence Assay&& &50 tests/53 mm plate&& &XY1692&& &LDH&& &LDH细胞毒性检测试剂盒 && &LDH Cytotoxicity Assay&& &500 tests/96 well plate&& &XY1693&& &TUNEL&& &TUNEL色标法细胞凋亡检测试剂盒 && &Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay&& &50 tests/96 well plate&& &XY1694&& &CSK&& &活/死细胞检测试剂盒&& &Live/Dead Cell Staining Kit&& &1000 tests/96 well plate&& &XY1695&& &CAS&& & 细胞凋亡蛋白酶-3分析试剂盒&& &Caspase-3 Assay&& &100 tests&& &XY1696&& &微生物检测试剂盒&& &&& &&& &&& &XY1697&& &MYCO&& & 支原体PCR检测试剂盒&& &Mycoplasma PCR Detection Kit&& &100 tests&& &XY1698&& &酶活力检测试剂盒&& &&& &&& &&& &XY1699&& &GalC&& & β-半乳糖苷酶比色检测试剂盒 &&& &Beta-Galactosidase Colorimetric Assay&& &50 tests/53 mm plate&& &XY1700&& &LDH&& &LDH细胞毒性检测试剂盒 && &LDH Cytotoxicity Assay&& &500 tests/96 well plate&& &XY1701&& &NPP&& &硝基苯酸钠（pNPP）磷酸酶检测试剂盒 && &pNPP Phosphatase Assay&& &500 tests/96 well plate&& &XY1702&& &GAPDH&& &比色法GAPDH分析试剂盒&& &Colorimetric GAPDH Assay&& &100 tests/96 well plate&& &XY1703&& &SOD&& & 超氧化物歧化酶分析试剂盒&& &Superoxide Disutase Assay&& &100 tests&& &XY1704&& &CAT&& & 过氧化氢酶活性分析试剂盒&& &Catalase Activity Assay&& &100 tests&& &XY1705&& &GPx&& &谷胱甘肽过氧化物酶分析试剂盒&& &Glutathione Peroxidase Assay&& &100 tests&& &XY1706&& &COX&& &细胞色素C氧化酶含量试剂盒&& &Cytochrome C Oxidase Assay&& &100Tests in cuvette && &XY1707&& &CS&& &柠檬酸合成酶的检测试剂盒&& &Citrate Synthase Assay&& &100Tests in cuvette && &XY1708&& &GDH&& &谷氨酸脱氢酶检测试剂盒&& &Glutamate Dehydrogenase Assay&& &100 Tests in 96-well plat&& &XY1709&& &HK&& &己糖激酶检测试剂盒&& &Hexokinase Assay&& &100 Tests in 96-well plat&& &XY1710&& &G6PDH&& &萄糖-6-磷酸 磷酸脱氢酶检测试剂盒&& &Glucose-6-phosphate Dehydrogenase Assay&& &100 Tests in 96-well plat&& &XY1711&& &XO && &黄嘌呤氧化酶分析试剂盒&& & Xanthine Oxidase Assay && &100 Tests in 96-well plat&& &XY1712&& &ALT&& &"丙氨酸转氨酶分析试剂盒"&& & Alanine Transaminase Assay && &100 Tests in 96-well plat&& &XY1713&& &GPDH&& &甘油醛3磷酸脱氢酶分析试剂盒&& & Glycerol-3-phosphate Dehydrogenase Assay & && &100 Tests in 96-well plat&& &XY1714&& &GST&& &"谷胱甘肽S转移酶分析试剂盒"&& & Glutathione S-transferases Assay & && &100 Tests in 96-well plat&& &XY1715&& &ADH&& &"乙醇脱氢酶分析试剂盒"&& & Alcohol Dehydrogenase Assay & && &100 Tests in 96-well plat&& &XY1716&& &ALDH&& &" 醛脱氢酶分析试剂盒"&& & Aldehyde Dehydrogenase Assay & && &100 Tests in 96-well plat&& &XY1717&& &&& &&& &&& &&& &XY1718&& &阳离子阴离子检测试剂盒&& &&& &&& &&& &XY1719&& &MGPA&& &孔雀绿磷酸盐检测试剂盒 && &Malachite Green Phosphate Assay&& &2500 tests/96 well plate&& &XY1720&& &CCA&& &比色法钙分析试剂盒 && &Colorimetric Calcium Assay&& &250 tests/96 well plate&& &XY1721&& &Ir&& &铁元素检测试剂盒&& & Iron Assay&& &100 tests&& &XY1722&& &代谢物检测试剂盒&& &&& &&& &&& &XY1723&& &LAC&& &L &- 乳酸含量分析试剂盒&& &L-Lactate Assay&& &100 Tests in 96-well && &XY1724&& &GLU&& &谷氨酸检测试剂盒&& &Glutamate Assay&& &100 Tests in 96-well plat&& &XY1725&& &NAD&& &"NAD/NADH 含量检测试剂盒"&& &"NAD/NADH Assay"&& &100 Tests in 96-well plate&& &
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【求助】【求助】Live/Dead assay kit试剂盒测细胞死活
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这个帖子发布于8年零39天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
请问谁用过Live/Dead assay kit试剂盒啊，我想用，可是这个东西对我来说较贵，想先看一下说明，哪位能给个说明书看看啊？另外能不能帮我翻译下面的文字？我怎么看不懂啊！非常感谢！Cell Viability ProfilesThe cell viability profile across intact beads was determinedby manual counting using a Live/Dead assay kitcontaining two fluorescent probes, Ethidium homodimer-1 and Calcein AM. Ethidium homodimer-1 cannotpenetrate live cells but stains the DNA of dead cells red.Calcein-AM penetrates live cells where an esterasecleaves the molecule which then fluoresces green—deadcells contain no esterase. In order to visualize cells, thebeads were cut in half using a blade and soaked in theLive/Dead solution for 1 h. Their diameter was estimatedmicroscopically and from their weight. They werethen examined under a Bio-Rad (Hercules, CA, USA)MRC 1024 confocal microscope equipped with a 15-milliwatt Krypton argon laser. The number of live(green) and dead (red) cells were counted manually inthe peripheral and central portions in the bead. At leastfour fields each containing at least 15 cells was countedin each area. The proportion of live and dead cells wasthen calculated from pooled results.
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单词不认识还是完全不懂？还好啊
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LIVE/DEAD& Sperm Viability Kit
LIVE/DEAD& Sperm Viability Kit
货号：&L7011
Molecular Probes&
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The LIVE/DEAD Sperm Viability Kit provides a novel fluorescence-based assay for analyzing the viability and fertilizing potential of sperm by fluorescence microscopy or flow cytometry. Membrane-permeant SYBR& 14 nucleic acid stain labels live sperm with green fluorescence, and membrane-impermeant propidium iodide labels the nucleic acids of membrane-compromised sperm with red fluorescence.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Bovine sperm. LIVE/DEAD(R) Sperm Viability Kit.
Compatible Cells:
Sperm Cells,&Eukaryotic Cells
For Use With (Equipment):
Fluorescence Microscope,&Flow Cytometer
Detection Method:
Fluorescent
Slide(s),&Tube(s)
Product Size:
Shipping Condition:
Room Temperature
内容及储存
Store in freezer (-5 to -30&C) and protect from light.
0 || results.spectraList.length > 0">
0 || results.protocolList.length > 0">
手册和实验方案
0 || results.lullList.length > 0">
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Live/Dead Baclight Bacterial Viability Kit 显微镜看活菌/死菌，细菌乱动无法照相
如题，应该是细菌随着玻片上的液体移动。我用5ul染色菌液，18mm*18mm盖玻片压片。尝试将压片体积从1ul改变到10ul，结果都一样动的厉害，拍出来的照片基本上就是一条细菌运动轨迹。。。有没有做这个的同学，交流一下吧
可以用吸水纸吸干多余水，这样盖片就不会乱动了
多谢回复！我用的染料是跟细胞膜通透性有关的，细胞膜完整的细菌只能通过绿色染料被染成绿色，而细胞膜损坏的细菌则可以通透红色染料呈现红色。如果用酒精灯烤干的话恐怕细胞膜早就坏掉了。。。
多谢你的回复！我没有用油镜，用的是Leica的荧光显微镜，40x物镜，可能因为是荧光，所以相对灵敏一些，从目镜可以清晰看到细菌的荧光，但就是动的太厉害，无法拍照
多谢！可是我只加了5ul菌液压片，液体并没有溢出盖玻片。而且也尝试了更少菌液压片，都不行。。。好纠结
先染色，在固定，在拍照？
先等一段时间，等一段时间细菌染色后，该成绿色的是绿色，该成红色的成红色了，再热固定了拍照？这样不成吗？
热固定的话所有的菌都会变成红色了。。。为啥看别人文章上的图拍的那么清楚呢。。。
发个别人文章链接看看
Live/Dead Baclight Bacterial Viability Kit 这个技术使用来细菌计数的吗？
请问你最后成功的染色步骤是怎样呢？我也是菌种既被染成了红色又被染成了绿色
油镜肯定有这样的问题，楼主要不换成40倍荧光镜头，制完片后不要立即看，让水干干再拍，再缩短下曝光时间试试。
请问固定的话是直接把固定油滴在膜上吗？
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随时随地聊科研& [求助]FACS Live Dead Assay ？
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[求助]FACS Live Dead Assay ？
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[求助]FACS Live Dead Assay ？
想问论坛里有谁亲自做过FACS Live Dead Assay using-Live/Dead Reduced Biohazard Viability/Cytotoxicity Kit (Molecular Probes, Cat no: L-7013)。
尽管说明里已经说得很清楚，但是在上流式细胞仪时，需要进行哪些设置？
我对流式细胞仪还不怎么熟悉。
所以需要问清楚，因为我这两天需要做呢！
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回复 #1 伊莎贝拉 的帖子
没做过。不过看了说明书之后，很简单，只要检测FL1和FL3两个通道的荧光。在BD FACS calibur机器上，这两个通道不需要调节补偿。
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回复 #2 cocacola 的帖子
还是不明白。
在进行Instrument configuation里如何设计？如何Specify the laser and detector?
FL1和FL3？ 在experment layout里如何设计？因为live cells用FITC, 绿色的，dead cells 用PE，红色。比如我们进行干细胞表面抗原检测，会设计CD73-FITC,CD45-PE等。
我将要用的是这个试剂盒。LIVE/DEAD(R) Reduced Biohazard Viability/Cytotoxicity Kit #1 (L-7013)
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是不是我在experment layout里如何设计SYTO-FITC, DEAD RED-PE, 即可？
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我们实验室用的机器不是你说的那个，是BD FACSCanto II Flow Cytometer.
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是不是我在experment layout里如何设计SYTO-FITC, DEAD RED-PE, 即可？
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按照说明书上的描述，SYTO是FL1通道检测，但是DEAD RED是属于FL3通道检测的。只要设置这两个指标即可。你如果要同时使用其它抗体，必需避开这两个通道，也就是FITC、PE-CY5.5这些标记不能用。
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我们实验室用的机器不是你说的那个，是BD FACSCanto II Flow Cytometer.
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FACSCanto就比CAlibur多1个紫外激发的激光器，其它指标都一样。
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按照说明书上的描述，SYTO是FL1通道检测，但是DEAD RED是属于FL3通道检测的。只要设置这两个指标即可。你如果要同时使用其它抗体，必需避开这两个通道，也就是FITC、PE-CY5.5这些标记不能用。
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不好意思，我还是不大明白。因为之前我只做了干细胞表面多种抗原的检测。所以对于干细胞死活性检测还不知道如何做》
那如何设置FL1和FL3这两个通道？我在BD FACSCanto II的软件上没看到FL1和FL3？？？
另外，也不用做compensation control?
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不好意思，我还是不大明白。因为之前我只做了干细胞表面多种抗原的检测。所以对于干细胞死活性检测还不知道如何做》
那如何设置FL1和FL3这两个通道？我在BD FACSCanto II的软件上没看到FL1和FL3？？？
我看文献，FITC 属于FL1通道，但是PE属于FL2通道，而PE-CY5 属于FL3或者FL4通道？但如何区分？还是不懂？
另外，也不用做compensation control?
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补偿是肯定不需要的，因为FL1和FL3之间不需要调节补偿。
FL1和FL3是检测的通道，你可以咨询一下你们实验室检测的流式老师。我用的是FACS Calibur，用的软件不一样。}