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&&&&&&&美国ScienCell研究实验室（）成立于1999年，公司总部位于美国加州的圣地亚哥。主要致力于实验室科研用原代细胞、原代细胞专用培养基、原代细胞无血清培养基、干细胞、干细胞培养基、干细胞无血清培养基的研究和开发，在全球拥有众多客户。在国内销售15年来，很多老师应用其产品发表了高质量的SCI文章，且有着极高的文献引用率。凭借着严格的质控和优秀的产品品质，深受广大科研工作者的信赖。
&&&&&&&&&ScienCell研究实验室生产的原代细胞、原代细胞专用培养基都经过了严格的质量控制，细胞纯度可达98％。其中包括21种人体正常细胞系统，90多种不同细胞类型。大多数细胞在全球唯有ScienCell实验室能够成功分离，产品质量过硬。确保了实验结果的重复性和连贯性。
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间充质干细胞生长因子说明：
货号：7562
Product Description
Mesenchymal Stem Cell Growth Supplement serum free (MSCGS-sf) is a medium supplement designed for the optimal growth of human primary mesenchymal stem cells (MSCs) in vitro. It is a sterile, concentrated (100X) solution which contains growth factors, hormones, and proteins necessary for the culture of normal human MSCs. The supplement is formulated (quantitatively and qualitatively) to provide a defined and optimally balanced serum free growth environment that maximally promotes the growth of human primary MSCs in vitro. The supplement is designed as an additive for mesenchymal stem cell serum free medium (MSCM-sf, Cat. No. 7511) and should be used in conjunction with that medium.
Components
MSCGS-sf is packaged in the quantity of supplement suited for a 500 ml bottle of mesenchymal stem cell serum free medium. MSCGS-sf consists of BSA, apo-transferrin, insulin, EGF, FGF-2, other growth factors (proprietary information) and hydrocortisone.
Product Use
MSCGS-sf is for research use only.& It is not approved for human or animal use, or for application in in vitro diagnostic procedures.
Store the MSCGS-sf at -20oC before adding to basal medium.
Prepare for use
Thaw MSCGS-sf at 37oC. Gently tilt the MSCGS-sf tube several times during thawing to help the contents dissolve. Make sure the contents of the supplement are completely dissolved into solution before adding to the medium. Rinse the bottle and tubes with 70% ethanol, and then wipe to remove excess. Remove the cap, being careful not to touch the interior threads with fingers. Add MSCGS-sf and P/S solution into basal medium in a sterile field, mix well and then the reconstituted medium is ready for use. Since several components of MSCM-sf are light-labile, it is recommended that the medium not be exposed to light for lengthy periods of time. If the medium is warmed prior to use, do not exceed 37oC. When stored in the dark at 4oC, the reconstituted medium is stable for one month.
&&如需要其他产品资料请发邮件至索取
&Sciencell公司产品由上海中乔新舟生物科技有限公司优质供应&
&&&&&&&近几年的新药研发成功率在逐年下降，其根本原因之一就是传统的药物筛选系统是建立在只具有30-40%人类基因群的一系列细胞株上。这样一个有&缺陷型&药物筛选系统所产生的药物用于人体上就会出现许多致命的弱点和不完整性。新一代药物筛选系统是含有一系列近乎完整的人类基因群的原代细胞株。而利用这些原代细胞株所甄别和筛选出来的候选药物，其诊治人类疾病的成功几率将大大增加。这样不但大大节省了新药的开发成本，而且将极大地提高人类的健康质量。这些产品从根本上提高了全球生命医学研究、人类重要疾病药物研发、新药研发的成功率。所以上海中乔新舟生物科技有限公司致力于提供优质原代细胞产品和完善的售后服务。&
&&&&&&&美国ScienCell研究实验室（）成立于1999年，公司总部位于美国加州的圣地亚哥。主要致力于实验室科研用原代细胞、原代细胞专用培养基、原代细胞无血清培养基、干细胞、干细胞培养基、干细胞无血清培养基的研究和开发，在全球拥有众多客户。在国内销售15年来，很多老师应用其产品发表了高质量的SCI文章，凭借着严格的质控和优秀的产品品质，深受广大科研工作者的信赖。
&&&&&&&&ScienCell研究实验室生产的原代细胞、原代细胞专用培养基都经过了严格的质量控制，细胞纯度可达98％。其中包括21种人体正常细胞系统，90多种不同细胞类型。大多数细胞在全球唯有ScienCell实验室能够成功分离，产品质量过硬。&确保了实验结果的真实性、重复性和连贯性。
Sciencell公司部分原代细胞目录（如需要其他细胞资料请发邮件至&索取）：&
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&&&&&&&&&中乔新舟的PI团队已经发展到专职PI&20人，联席PI&312人，其中大多数拥有海外背景。截止到2009年3月，以PI或联席PI为第一作者发表SCI&论文1682&篇（总IF&值为5721.82，其中影响因子IF&5.0&的论文216&篇，IF&10.0论文32&篇）。
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地黄低聚糖对人脂肪组织源性间充质干细胞分泌肝细胞生长因子的影响
【摘要】：正脂肪组织源性间充质干细胞(ADMSCs)是近年来发现的一种来源于脂肪的成体干细胞。研究表明,ADMSCs具有分化为心肌、内皮、神经等多种组织的潜能,并且能分泌血管内皮生长因子(VEGF)、肝细胞生长因子(HGF)及转化生长因子β(TGF-β)等细胞因子,因此,ADMSCs作为种子细胞有希望进行心肌等组织再生的治疗。地黄低聚糖(RGO)系从地黄中提取的低分子量多糖成分。有研究表明,RGO
【作者单位】：
【分类号】：R285【正文快照】：
脂肪组织源性间充质干细胞(ADMSCs)是近年来发现的一种来源于脂肪的成体干细胞。研究表明，ADMSCs具有分化为心肌、内皮、神经等多种组织的潜能，并且能分泌血管内皮生长因子(vEGF)、肝细胞生长因子(HGF)及转化生长因子p(TGF一团等细胞因子，因此，ADMSCs作为种子细胞有希望
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淘豆网网友近日为您收集整理了关于不同分化状态的间充质干细胞向肝细胞生长因子的趋化性迁移分析的文档，希望对您的工作和学习有所帮助。以下是文档介绍：苏州大学硕士学位论文不同分化状态的间充质干细胞向肝细胞生长因子的趋化性迁移研究姓名:郑彦文申请学位级别:硕士专业:细胞生物学指导教师:张焕相不同分化状态的问充质干细胞向肝细胞生长因子的趋化性迁移研究中文摘要中文摘要神经胶质瘤是颅内最常见的恶性肿瘤,具有扩散和浸润的特性,即使经过外科手术切除,并辅以放疗或化疗,也难以彻底治愈。因此,需要新的治疗方法来追踪逃离常规治疗的散在瘤细胞。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是具有多向分化潜能的成体干细胞,而且能够趋向胶质瘤及多种趋化因子迁移,从而成为治疗胶质瘤的理想载体细胞。然而MSCs定向迁移的机制还不是完全清楚,尤其是MSCs分化状态与迁移之间关系的研究还未见报道。本实验旨在研究不同分化状态的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)的趋化性迁移。本研究首先采用Percoll密度梯度离心法从大鼠骨髓中分离出BMSCs,体外扩增培养,通过观察细胞形态、生长特性,免疫荧光染色,成骨、成脂诱导分化,对BMSCs进行鉴定。结果显示,分离培养的BMSCs为长梭形,增殖速度快,表面抗原CD29、CD90、CDl06呈阳性,CD34、CD45为阴性,并且体外能够诱导分化为成骨细胞及脂肪细胞,证明分离培养的细胞是具有多向分化潜能的BMSCs。随后通过丁羟基茴香醚(butyl hydroxy anisol,BHA)联合碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)诱导BMSCs成神经分化,即先用10 ng/rnlbFGF预诱导24 h,再用200州BHA和2%DMSO诱导5 h,最后用含有N2的H.DMEM维持培养。观察该过程中细胞的形态变化,免疫细胞化学染色检测神经细胞特异性标志物nestin、D.III.tubulin及NSE的表达变化。结果显示,未分化BMSCs呈成纤维细胞样;预诱导24 h后,胞体稍有收缩,边缘变得不齐整:诱导5 h,胞体收缩成圆形或椭圆形,折光性强,有突起伸出;维持培养18 h后,细胞出现3个或更多突起;维持培养48 h,细胞突起更为复杂,出现二级分叉,突起长度增加,与其他细胞的突起相互接触。免疫荧光染色显示,nestin与p.III.tubulin的表达都呈现出先增高后降低的趋势,均在诱导5 h时达到最高值,之后显著下降;而NSE阳性细胞比率在诱导期以及维持前期都很低,到维持48 h显著升高;GFAP在整个诱导分化过程中始终为阴性。接着运用Dunn chamber装置研究了BMSCs及成神经分化不同状态BMSCs向中文摘要不同分化状态的问充质干细胞向肝细胞生长因子的趋化性迁移研究HGF的趋化性迁移,计算细胞迁移速率和迁移效率。结果显示,在趋化性迁移实验中,即外槽加入不同浓度HGF、内槽只加L.DMEM时,细胞的迁移速率没有变化,迁移效率随着HGF浓度的增加而增高;与对照组(内外槽均只加入LDMEM)相比,50 ng/ml及100 ng/ml HGF均显著提高了细胞的迁移效率,但两者之间没有差异。当内外槽均加入50 ng/ml HGF,细胞的迁移速率及迁移效率与对照相比无差异,表明HGF能够诱导BMSCs定向迁移。接着我们研究了成神经分化的BMSCs向HGF的趋化性迁移,结果显示外槽加入50 ng/ml HGF未能改变分化各点细胞的迁移速率,但显著提高了未分化、预诱导24 h、诱导5 h及维持48 h细胞的迁移效率,表明成神经分化的BMSCs向HGF的趋化迁移能力与其分化状态密切相关。用P13K抑制剂LY洲)预处理1 h的BMSCs进行趋化迁移实验,外槽加入HGF后,细胞迁移效率与未处理组细胞相比显著降低,即LY294002阻断了HGF诱导BMSCs的定向迁移,证明P13K信号通路参与介导HGF诱导BMSCs的定向迁移过程。最后,通过改变Racl的表达水平,观察BMSCs随机迁移行为及HGF诱导的定向迁移行为的变化。发现Racl过表达后,BMSCs迁移速率及趋向HGF的迁移效率显著提高;干扰Racl表达后,迁移速率及趋向HGF的迁移效率显著降低。结果表明Racl调节BMSCs的迁移速率,并且参与介导HGF诱导BMSCs的定向迁移过程。以上结果表明,HGF能够趋化BMSCs的定向迁移,P13K信号通路参与介导这一过程;成神经分化的BMSCs趋向HGF的迁移能力与其分化状态密切相关。Racl调节BMSCs迁移速率,并且介导HOF诱导BMSCs的定向迁移。本研究为进一步揭示BMSCs的定向迁移机制及临床应用BMSCs进行移植提供了理论基础。关键词:骨髓间充质干细胞;细胞分化:肝细胞生长因子;细胞迁移;Racln作者:郑彦文指导教师:张焕相教授Tropism ofDifferentiating Mesenchymal Stem Cells for HGF AbstractTropism of Differentiating Mesenchymal Stem Cells for HGFAbstractDue to the infiltrating nature of tunlol苫,the treatment of malignant gliomasinvariantly fails despite extensive surgical excision and adjuvant radio·-and chemo-·therapy.Therefore,new therapeutic strategies are needed to selectively target tumorcells,including those that have escaped from the main tumor mass.Mesenchymal stemcells(MSCs)are adult stem cells with the capacity to differentiate into osteoblasts,chondroeytes and adipocytes.In addition,the migratory capacity of MSCs towardsgliomas and several chemotatic factors has made these cells attractive therapeutic tool ingene therapy for gliomas.However,little is known about the migratory capacity ofMSCs with respect to their differentiation states.The aim of our study was tocharacterize the migratory behavior of bone marrow mesenchymal stem cells(BMSCs)during neurogenic differentiation in response to hepatocyte growth factor(HGF).BMSCs were isolated from bone marrow of rats by Percoll gradient centrifugationand expanded.The cells were characterized by morphology,antigen expression anddifferentiation potential.The results showed that BMSCs displayed fibroblast—like shapeand proliferated quickly.Immunofluorescence analysis showed that BMSCs werepositive for CD29,CD90,and CD 1 06,and negative for CD34,CD45.Moreover,BMSCs were induced to differentiate into adipocytes and osteoblasts,demonstratingthat these cells are multipotential BMSCs.BMSCs were induced to neuron.1ike cells by basic fibroblast growth factor(bination with butyl hydroxy anisol(BHA).The undifferentiated BMSCs werefibroblast.1ike.After preinductin in 1 0 n∥“bFGF for 24 h,the edge of the cellsbecame rough.Cells after 5-h induction in medium containing 2%DMSO and 200蝉BHA displayed nucleus refractile cell bodies and long branching processes,with theIIIAbstract Tropism of Differentiating Mesenchymal Stem Cells for HGFcytoplasm retracted towards the nucleus.After maintaining in H-DMEM containing N2for 48 h,the inued to elaborate,displaying primary and secondarybranches,growth cone.1ike terminal structures that frequently made contact with othercells.Immunofluorescence staining showed that the expression of neural stem cellmarker nestin and early state neuronal marker 13-III—tubulin increased and peaked at 5-hinduction,and then decreased significantly,while the ratio of cells expressing NESremained low before maintaining period and increased remarkably after maintaining for48 h.The cells were constantly GFAP negative during differentiation.In this study,we utilized a Duma chamber in conjunction with time—lapse videoanalysis to directly observe and follow the HGF—induced migration of differentiatingBMSCs.The data recorded by Leica AF6000 were analyzed by NIH Image J to getmigration speed and migration efficiency.The chemotaxis analysis,in which the outerwell was filled with 50 ng/ml HGF and the inner well with L-DMEM only,showed thatHGF did not change the migration speed of BMSCs,while the migration efficiency ofBMSCs increased gradually wim the increasing concentration of HGF.In contrast,neither the migration speed nor the migration efficiency Was changed in thechemokinesis experiment in which both inner and outer wells were filled with 50 ng/mlHGF.The data indicate that HGF can induce the directed migration of BMSCs bychemotaxis.Next,we analyzed the chemotactic migration of BMSCs in neurogenicdifferentiation in response tO the concentration gradients of HGE.n圮migration assayshowed that HGF at 50 ng/n[1l did not change the migration speed of the cells at anystate in neurongenic differemiation.However,HGF elevated the migration efficiency ofundifferentiated BMSCs,and BMSCs pre—induced for 24 h,induced for 5 h andmaintained for 48 11.but not those maintained for 1 8 h.m results indicate that thedirected migration of BMSCs towards HGF is closely related to their differentiationstates.To explore the role ofP13K signaling pathway in the tropism of BMSCs for HGF,the cells were pretreated f.0r 1 h with LY州),a specific inhibitor of P13K,and then used for chemotaxis assay.111e data showed that the migration efficiencydecreased pared with untreated cells,indicating that P13K participatesⅣTropism ofDifferentiating Mesenehymal Stem Cells for HGF Abstractin the directed migration of BMSCs to HGF.To determine the role of Racl in HGF-induced migration,we altered the Raelexpression in BMSCs and then analyzed the migratory behavior of these cells.Theresults showed that both the migration speed and migration efficiency were increased byup-regulation of Racl,while decreased by down-regulation of Rael,suggesting thatRael regulates the HGF·induced migration ofBMSCs.In conclusion,the isolated BMSCs from bone marrow by Percoll gradientcentrifugation ale multipotential and capable of differentiating into neuron-like cells bination with BHA.HGF could induce the directional migration of BMSCs,which is mediated by the P13K signaling pathway.In addition,the migration of cellsduring neurogenic differentiation towards HGF is closely related to their differentiationstates.Rac l regulates the migration speed and participates in the HGF-inducedmigration of BMSCs.The present study would contribute to better understanding of thedirected migration of BMSCs and thus,help design strategies for the clinicalapplications of BMSCs.Key words:bone marrow mesenchymal stem cells(BMSCs);hepatocyte growth factor(HGF);RaelVWritten by:Yanwen ZhengSupervised by:Huanxiang Zhang苏州大学学位论文独创性声明|I 7&3 7工2本人郑重声明:所提交的学位论文是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。论文作善签名:兰孽江日期:必.苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定,即:学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所(含万方数据电子出版社)、中国学术期刊(光盘版)电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文,可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属在 L月解密后适用本规定。非涉密论文口论文作者签名;聋盘垫日导师签名:期:塑!!:皇:翌El期:2璺!!!皇塞1 2移不同分化状态的问充质于细胞向肝细胞生长因子的趋化性迁移研究序言序言目前临床治疗原发脑瘤如多形性恶性胶质瘤,主要采用手术、放疗和化疗的方法,以达到根除肿瘤或减轻肿瘤负荷的目的,但是这些治疗方法通常有损伤正常组织、降低患者免疫功能等严重副作用。而且由于肿瘤细胞极具浸润性,外科手术无法完全切除,散在的肿瘤细胞极易扩散导致肿瘤复发、致死率极耐11。因此,急需新的治疗手段来追踪、杀死散在的瘤细胞【21。基因治疗是最具希望的疗法之一,因此实现治疗成分的有效递送成为关键13J。许多体内外实验已经证明神经干细胞(neural stem cells,NSCs)可以穿过脑组织向肿瘤细胞迁移f4巧】。Aboody等【5】将永生化的小鼠C17.2神经干细胞分别植入或注入荷瘤半球的原位、同侧、对侧以及尾静脉或一侧脑室,观察到神经干细胞均可以向肿瘤病灶定向迁移,使得NSCs作为载体携带治疗基因或药物追踪散在瘤细胞来治疗神经胶质瘤成为可能。然而,分离NSCs面临的技术困难、伦理道德问题及同种移植的免疫相容问题等使其临床应用受到限制。因此,有必要寻找其他的载体细胞。骨髓来源的间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)是存在于骨髓中的非造血干细胞【6】,由Friedenstein[z]首次发现并报道。BMSCs具有多向分化潜能,在一定条件下能够分化成多种组织类型,包括骨、软骨、肌肉、韧带,肌腱和脂肪等【8卅。此外,有研究报道来源于人、大鼠、小鼠的BMSCs在体外可以被诱导成神经样细胞,具有神经细胞的形态,并且表达神经元特异性的标志tubulin以及神经元特异性的核蛋白NeuN[10-131。这一分化潜能加强了其治疗神经系统疾病的有效性。目前,诱导BMSCs向神经细胞分化有多种方案,常用的诱导剂包括丁羟基茴香醚(butylated hydroxy anisole,BHA),二***亚砜(DMSO),B.巯基乙醇(1B-mercaptoethanol,p.ME),硫代甘油,cAMP,表皮样生长因子(epidermal growth factor,EGF),脑源性神经营养因子(brain.derived neurotrophicfactor,BDNF),维A酸(retinoicacid)等【12】。DMSO、p.№均为强抗氧化剂,能够将BMSCs从氧化状态释放出来,使其转化成神经元样或胶质样细胞,但其作用机理尚不明确【141。联合应用异丁***黄嘌呤(IBMX)和二丁基环磷酸腺苷(dbcAMP)提高细胞内cAMP的含量,亦可将BMSCs转变为神经元样细胞uⅢ。通过与胎鼠中脑或者纹状体细胞共培养,也能够诱导部分BMSCs分化成神经样细序言不同分化状态的间充质千细胞向肝细胞生长因子的趋化性迁移研究胞,因为神经胶质细胞可分泌一些神经营养因子,为神经元及其前体细胞的生长提供营养和支持作用【ll’15—61。除了多分化潜能外,BMSCs还具有趋向胶质瘤迁移的特性。Nakamizo等【17l研究第一次证实无论在荷瘤同侧还是对侧颈内动脉注入人的间充质干细胞(humanmesenchymal stem cells,hMSCs),都可以在肿瘤中发现,并认为这种现象是hMSCs趋向胶质瘤迁移所致。BMSCs这种趋向胶质瘤迁移的特性,使其成为治疗恶性肿瘤的理想载体细胞【l研。此外,BMSCs还具有易于从病人自身获得,可以避免免疫排斥等优点,使自体移植易于临床实施【191。因此,BMSCs已经成为组织工程、细胞工程中最具希望的种子细胞。目前,关于间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)定向迁移机制的研究已经取得了一定进展。研究发现hMSCs表达一系列趋化因子受体,可以响应各因子而定向迁移po-23]。如基质细胞衍生因子(stromalcell.derived factor,SDF.1a)与其受体CXCR4结合可以介导BMSCs向损伤组织的迁移[24-251,VEGF.A则促进了BMSCs趋向胶质瘤的迁移【211。肝细胞生长因子(hepatocye growth factor,HGF),又称扩散因子(scarer factor,SF),是骨髓微环境分泌的主要细胞因子之一刚。HGF主要作用是调节造血干细胞的增殖、分化以及血管发生【27粕】。在病理条件下,HGF可以诱导组织中肿瘤细胞的侵袭【291。最近发现胶质瘤细胞分泌的高浓度HGF,能够趋化NSCs的迁移【301。有研究表明,hMSCs表达HGF受体c.met,并且HGF可以促进单层培养的MSCs划痕的修复【3l】。HOF与c-met结合后在多种细胞类型中促进了细胞的迁移、扩散及增殖【321。但是,HGF对BMSCs迁移影响的研究还相对较少。细胞迁移涉及到细胞骨架的重排。Rho家族成员RhoA、Racl和Cdc42均可通过调节细胞肌动蛋白骨架的重新分布和构建,影响细胞的迁移【33】。肌动蛋白参与的众多细胞活动受Rael及其相关蛋白的调控,如血小板活化、淋巴细胞和成纤维细胞的黏附、细胞运动、细胞收缩和胞浆移动等【341。Itoh等【35】利用单细胞实时监测的单分子技术研究了妣l在人纤维肉瘤细胞HTl080细胞移动中的作用,发现在移动的细胞中Racl和Cdc42定位在不断的发生改变并在细胞膜前端逐渐聚集,当细胞改变移动方向时,Racl和Cdc42的活性迅速减少,提示Racl参与了细胞的迁移。因BMSCs具有成神经分化的潜能以及定向迁移的能力,可以用来移植治疗神经系统疾病以及追踪恶性肿瘤。而细胞治疗的关键是细胞到病灶部位的迁移。除2播放器加载中，请稍候...
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苏州大学硕士学位论文不同分化状态的间充质干细胞向肝细胞生长因子的趋化性迁移研究姓名:郑彦文申请学位级别:硕士专业:细胞生物学指导教师:张焕相不同分化状态的问充质干细胞向肝细胞生长因子的趋化性迁移研究中文摘要中文摘要神经胶质瘤是颅内最常见的恶性肿瘤,具有扩散和浸润的特性,即使经过外科手术切除,并辅以放...
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