下载丁香园App送15丁当
关注今日：16 | 主题：373405
每发1个新帖可以获得0.5个丁当奖励
【求助】western配胶问题
楼层直达：
这个帖子发布于2年零33天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
问题已解决悬赏丁当:2
我是新手刚刚开始做western，请问各位战友，1.0mm的胶和1.5mm的胶有什么区别？首先1.5mm浪费胶，0.75mm更省胶，这个我知道。请给我说点我不知道的。
上届学生告知：1.0mm和1.5mm胶没有本质区别，就是1.5mm切胶时不宜损坏，转膜时间段，建议我用1.5mm的，等熟练后改为1.0mm的，请问大家意见呢？
不知道邀请谁？试试他们
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
是可以先用1.5mm的，等熟练后改为1.0mm的分离胶。多练习几次熟练了就好了。
另外提供一些方法。用10%，浓缩胶（积沉胶）用4%。储存液配制：1. 5x样品缓冲液（10ml）:0.6ml
1mol/l的Tris-HCl(pH6.8),5ml 50%甘油，2ml 10%的SDS，0.5ml巯基乙醇，1ml
1%溴酚蓝，0.9ml蒸馏水。可在4℃保存数周，或在－20℃保存数月。2.
凝胶贮液：在通风橱中，称取丙烯酰胺30g，甲叉双丙烯酰胺0.8g，加重蒸水溶解后，定容到100ml。过滤后置棕色瓶中，4℃保存，一般可放置1个月。3.
分离胶缓冲液储液： Tris 36.3g ，加1mol/l HCl 48ml，加重蒸水80ml使其溶解，调pH8.9，定容至100ml，
4℃保存。4. 浓缩胶缓冲液储液： Tris 5.98g ，加1mol/l HCl
48ml，加重蒸水80ml使其溶解，调pH6.7，定容至100ml， 4℃保存。5.
TEMED（四乙基乙二胺）原液。6. 10%过硫酸铵
（用重蒸水新鲜配制）。7.
pH8.3 Tris-甘氨酸电极缓冲液：称取Tris
6.0g，甘氨酸28.8g，加蒸馏水约900ml，调pH8.3后，用蒸馏水定容至1000ml。置4℃保存，临用前稀释10倍。8.
考马斯亮蓝G250染色液：称100mg考马斯亮蓝G250，溶于200ml蒸馏水中，慢慢加入7.5ml
70%的过氯酸，最后补足水到250ml，搅拌1小时，小孔滤纸过滤。配制可参照下表|||Western
Blot一．配胶注意一定要将玻璃板洗净，最后用ddH2O冲洗，将与胶接触的一面向下倾斜置于干净的纸巾晾干。分离胶及浓缩胶均可事先配好（除AP及TEMED外），过滤后作为储存液避光存放于4℃，可至少存放1个月，临用前取出室温平衡（否则凝胶过程产生的热量会使低温时溶解于储存液中的气体析出而导致气泡，有条件者可真空抽吸3分钟），加入10%AP（0.7~0.8:100,
分离胶浓度越高AP浓度越低，15%的分离胶可用到0.5:100）及TEMED（分离胶用0.4:1000,
15%的可用到0.3:1000，浓缩胶用0.8：1000）即可，如室温较低可升高10%AP及TEMED浓度到《分子克隆》建议浓度。封胶：灌入2/3的分离胶后应立即封胶，胶浓度＜10%时可用0.1%的SDS封，浓度＞10%时用水饱和的异丁醇或异戊醇，也可以用0.1%的SDS。封胶后切记，勿动。待胶凝后将封胶液倒掉，如用醇封胶需用大量清水及ddH2O冲洗干净，然后加少量0.1%的SDS，目的是通过降低张力清除残留水滴。片刻后倒掉SDS，将玻璃板倒立放置片刻控净。4．灌好浓缩胶后1h拔除梳子，注意在拔除梳子时宜边加水边拔，以免有气泡进入梳孔使梳孔变形。拨出梳子后用ddH2O冲洗胶孔两遍以去除残胶，随后用0.1%的SDS封胶。若上样孔有变形，可用适当粗细的针头拨正；若变形严重，可在去除残胶后用较薄的梳子再次插入梳孔后加水拔出。30min后即可上样，长时间有利于胶结构的形成，因为肉眼观的胶凝时其内部分子的排列尚未完成。(10%的AP最好现配现用，如在4℃存放勿超过两周。30%的丙烯酰胺如有沉淀，最好弃掉.)二．样品处理1．培养的细胞（定性）：
⑴ 去培养液后用温的PBS冲洗2~3遍（冷的PBS有可能使细胞脱落）。
对于6孔板来说每孔加200~300μl，60~80℃的1×loading buffer。
⑶ 100℃，1min。
用细胞刮刮下细胞后在EP管中煮沸10min，期间vortex 2~3次。
用干净的针尖挑丝，如有团块则将团块弃掉，如果没有团块但有拉丝现象，则可以将EP管置于0℃后在g离心2min，再次挑丝。若无团块也无丝状物但溶液有些粘稠，可通过使用1ml注射器
反复抽吸来降低溶液粘滞度，便于上样。
⑹ 待样品恢复到室温后上样。2．培养的细胞（定量）：
去培养液后用温的PBS冲洗2~3遍（冷的PBS有可能使细胞脱落）。
⑵ 加入适量的冰预冷的裂解液后置于冰上10~20min。⑶
用细胞刮刮下细胞，收集在EP管后超声（100~200w）3s，2次。⑷ 12000g离心，4℃，2min。⑸ 取少量上清进行定量。⑹
将所有蛋白样品调至等浓度，充分混合沉淀后加loading buffer后直接上样最好，剩余溶液（溶于1×loading
buffer）可以低温储存，-70℃一个月，-20℃一周，4℃ 1~2天，每次上样前98℃，3min。3．组织：
对于心肝脾肾等组织可每50~100mg加1ml裂解液，肺100~200mg加1ml裂解液。可手动或电动匀浆。注意尽量保持低温，快速匀浆。⑵
12000g离心，4℃，2min。⑶ 取少量上清进行定量。⑷ 将所有蛋白样品调至等浓度，充分混合沉淀加loading
buffer后直接上样最好，剩余溶液（溶于1×loading buffer）可以低温储存，-70℃一个月，-20℃一周，4℃
1~2天，每次上样前98℃，3min。(裂解液配方：Tris-Cl (pH7.4) 20mM，EDTA
1mM由于蛋白酶抑制剂可影响蛋白定量，且新鲜蛋白很少降解，故可不加，如加按建议比例即可。提取磷酸化的蛋白还需加Na3VO4 0.1mM及NaF
25mM）。1×loading buffer配方：10% 甘油，50mM Tris·Cl (pH6.8)，2%
β-巯基乙醇，0.2~0.5‰溴酚蓝，2%或5%的SDS。Buffer可配成2×~5×，注意SDS终浓度勿超过10%。对于心脏，肌肉等碎屑较多的组织可用5%的SDS，肝肾等组织2%即可。)三．电泳1．上样前将胶板下的气泡赶走。2．所有蛋白样品调至等浓度后上样，样品两侧的泳道用等体积的1×loading
buffer上样，Marker也用1×loading
buffer调整至与样品等体积。2．以初始电压为45V时的电流强度进行稳流电泳，当电压达65V时改为稳压电泳。3．在目的蛋白泳动至距胶下缘1cm以上结束。电泳液配方：Tris-base
glycine 14.4g,
0.1% SDS（10ml 10% SDS）/L
Tris-base 1.5g,
glycine 7.2g,
0.1% SDS（5ml 10%
SDS）/0.5L四．转膜1．电泳结束前20分钟左右戴上手套开始准备：湿转使用常规电转液：Tris 3.0g，Gly 14.4g， M-OH
200ml，加去离子水至1,000ml。干转则取此转移液，每50ml加入10%SDS180ul。浸泡NC膜：将NC膜平铺于去离子水面，靠毛细作用自然吸水后再完全浸入水中10min以排除气泡，随后浸泡入转移液中。PVDF膜则在M-OH中浸泡20min以上后转入转移液中。将滤纸也浸入转移液中。2．取胶：将胶卸下，保留30-100KD或分子量范围更广些的胶（以便以后杂其他感兴趣的蛋白），左上切角，在转移液中稍稍浸泡一下，置于洁净玻璃板上，按顺序铺上膜与每侧一张（干转每侧三张）滤纸。注意用玻棒逐出气泡，剪去滤纸与膜的过多部分（尤其是干转，以防止短路）3．转膜：湿转：电转槽用去离子水淋洗晾干，加入1,000ml电转液。将胶平铺于海绵上，滴加少许电转液再次驱赶气泡，封紧后放入电转槽，注意膜在正极一侧。降温，将电泳槽置于冰水混合物中。恒流100mA过夜，或400mA，4h。注意不同蛋白的要求不同。干转：用电转液淋洗石墨电极，滤纸吸干，铺上胶，再滴少许电转液，以1.5mA/cm2凝胶面积转移1-2小时。负载电压不宜超过1V/cm2胶面积。电转液配方：
Tris-base 3g,
glycine 14.4g,
甲醇/1L五．封闭及杂交1．封闭：将膜从电转槽中取出，去离子水与PBST或TTBS稍加漂洗，浸没于封闭液中缓慢摇荡一小时。必要时可先用丽春红染色（2%乙酸，0.5%丽春红的水溶液）观察蛋白条带，再用去离子水和TTBS将丽春红洗脱后封闭，如用蛋白marker则可省略此步。2．结合一抗：一抗的准备：使用反贴法时每张3×9cm2膜约需2ml一抗稀释液。反贴法的操作
：含一抗的封闭液滴加于摇床的塑料膜上，将Western膜从封闭液中取出，滤纸贴角稍吸干，正面朝下贴在一抗上，注意不要留下气泡，室温下轻摇孵育一小时或4℃静置过夜。在反应体系外面罩一湿润平皿以防止液体过多蒸发。3．洗涤：一抗孵育结束后，用PBST或TTBS漂洗膜后再浸洗三次，每次5-10min。4．结合二抗：根据一抗来源选择合适的二抗，根据鉴定方法选择HRP或AP标记的抗体，按相应比例稀释（1:00），室温轻摇一小时。5．洗涤：二抗孵育结束后，用PBST或TTBS漂洗膜后再浸洗三次，每次5-10min。PBST：
TTBS： Tris-HCl
20mM, pH 7.4 (25℃)
0.01% ~0.02%
150mMTween-20
0.05%封闭液与抗体溶剂均为含5%脱脂奶粉的PBST或TTBS，临用时取200ml PBST或
TTBS加入10g脱脂奶粉即为封闭液。六．发光鉴定一般使用辣根过氧化物酶
P-ECL发光法或碱性磷酸酶AP-NBT/BICP显色法。1．HRP-ECL发光法：将A、B发光液按比例稀释混合。膜用去离子水稍加漂洗，滤纸贴角吸干，反贴法覆于A、B混合液滴上，熄灯至可见淡绿色荧光条带（5min左右）后滤纸贴角吸干，置于保鲜膜内固定于片盒中，迅速盖上胶片，关闭胶盒，根据所见荧光强度曝光。取出胶片立即完全浸入显影液中1-2min，清水漂洗一下后放在定影液中至底片完全定影，清水冲净晾干，标定Marker，进行分析与扫描。2．AP-NBT/BICP显色法：每片NBT/BICP可溶解于30ml水中，使用前将一片分装在30个
EP管中，每张3×9cm的膜取一管配成1ml即可。将PBST或TTBS洗涤过的膜用去离子水稍加漂洗，滤纸贴角吸干，反贴法覆于NBT/BICP溶液液滴上，并用不透明物体（如报纸）遮挡光线，显色20s后每10s观察一次，至条带明显或有本底出现时将膜揭起置去离子水中漂洗后放滤纸上晾干即可观察与扫描。背景深浅与一抗的质量及二抗的量有关，当然如果暴光时间长达半小时，出现背景是正常的。七．增强敏感性若目的条带未出现，或很淡，可试用以下方法增强发光强度：用清水漂洗膜数分钟，重加发光液进行曝光，可延长曝光时间。将膜在PBST或TTBS中洗涤30min或更长，期间至少换2次液。封闭40~60min一抗杂交，室温1h。37℃
1h 会更强，但可能增加非特异条带。PBST或TTBS洗膜20min，期间换2次液。二抗杂交，37℃
1h。PBST或TTBS洗膜20min，期间换2次液。发光鉴定。若条带仍未出现或很淡，可以再用PBST或TTBS洗涤膜20min，期间换2次液。10．三抗杂交，室温1h。37℃
会更强，但可能增加非特异条带。三抗即抗二抗的二抗，比如二抗用羊抗兔，此时三抗可以选择兔抗羊或鼠抗羊等。11．PBST或TTBS洗涤膜20min，期间换2次液。12．发光鉴定。一抗溶液中加入0.2%
叠氮钠后可4℃存放至少2周（一个月我也用过，没问题，再长时间还没试）八．NC膜的多次使用一张NC膜可使用多次，对多种蛋白进行杂交，步骤与“七．增强敏感性”相近。如前次杂交结果条带距离本次杂交的蛋白的预计位置差别较大则只需用PBST洗涤掉发光液（10min×3次）后从一抗杂交开始，后续步骤同前。如前次杂交结果条带距离本次杂交的蛋白的预计位置较近则需更强的洗涤，可用 strip液（可用杂交袋）于室温摇动洗涤30min~60min，然后用PBST洗涤10min×3次，再从封闭开始，后续步骤同前。对于杂交若干次的膜，如果常规洗涤方法不易去掉众多条带，可用强度更强的自配的strip液（可用杂交袋）于50℃洗涤30min，然后用PBST洗涤10min×3次，再从封闭开始，后续步骤同前。以上仅供参考！|||上面讲解的很好，学习下|||分离胶用10%，浓缩胶（积沉胶）用4%
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
主要是一个上样量的问题吧？1.5mm的10孔的最大可以上到50ul的体积，而1.0mm的大概只能是30ul。有时候蛋白浓度低或者目的蛋白的丰度低的情况下需要多上样来弥补。所以用1.5mm的比较好。
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
我按照楼主的办法先配好胶（除了ap和temed外），一直在室温避光，临用前取用并加入ap和temed，可是有气泡产生，不知道怎么解决这个问题．
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
WB步骤多，操作繁琐，确实容易出问题，但是也没那么夸张。我一般灌了分离胶水封了以后就顺带把浓缩胶除AP和TEMED外的其他成分先配好混匀放室温，从来没有闭光过，等分离胶凝了以后，一般我会多等一会，大概一小时左右吧，再灌浓缩胶。混匀的过程中注意轻柔一点操作，但是完全没气泡基本不可能，产生了气泡也不要紧，只要不是剧烈摇晃气泡特别多就行。
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
western步骤多，操作繁杂，一半没人愿意接。但是只要操心去练，总会有成效的。从我发第一帖开始，半年多了，个人感觉熟练多了。
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
关于丁香园Western_blot_试剂配制及操作流程_百度文库
两大类热门资源免费畅读
续费一年阅读会员，立省24元！
Western_blot_试剂配制及操作流程
上传于||暂无简介
阅读已结束，如果下载本文需要使用1下载券
想免费下载本文？
下载文档到电脑，查找使用更方便
还剩2页未读，继续阅读
你可能喜欢western blot 试剂配制 - 百度文库
western blot 试剂配制
试剂配制：
（一）母液
1，1.0mol/L Tris·HCl
Tris (MW121.14) 30.29g
溶解后，用浓盐酸调pH至所需点（见下所示），最后用蒸馏水定容至250ml，高温灭菌后室温下保存。
约15ml 8.0
2，1.74mg/ml (10mmol/L)PMSF
溶解后，分装于1.5ml离心管中，－20℃保存。 3，0.2mol/L NaH2PO4
NaH2PO4（MW119.98）
500ml 溶解后，高压灭菌，室温保存。 4，0.2mol/LNa2HPO4
Na2HPO4·12H2O（MW 358.14） 71.6g 蒸馏水至
1000ml 溶解后，高压灭菌，室温保存。 5，10％SDS
50℃水浴下溶解，室温保存。如在长期保存中出现沉淀，水浴溶化后，仍可使用。 6，10％过硫酸胺（AP） 过硫酸胺
0.1g 超纯水
溶解后，4℃保存，保存时间为1周。 7，1.5mol/L Tris·HCl（pH8.8） Tris (MW121.14)
溶解后，用浓盐酸调pH至8.8，最后用超纯水定容至250ml，高温灭菌后室温下保存。
8，0.5mol/L Tris·HCl（pH6.8） Tris (MW121.14)
15.14g 超纯水
溶解后，用浓盐酸调pH至6.8，最后用超纯水定容至250ml，高温灭菌后室温下保存。 9，40％Acr/Bic（37.5：1）
丙稀酰胺（Acr）
甲叉双丙稀酰胺（Bic）
1g 超纯水至
37℃下溶解后，4℃保存。使用时恢复至室温且无沉淀。 10， 20％Tween20 Tween20
20ml 蒸馏水至
100ml 混匀后4℃保存。 （二）使用液
1，单去污剂裂解液（50mmol/L Tris·HCl pH8.0，150mmol/L NaCl，1％TritonX－100，100mg/ml PMSF）：
1mol/L Tris·HCl（pH8.0） 2.5ml
0.438g TritonX－100
混匀后， 4℃保存。使用时，加入PMSF至终浓度为100mg/ml（0.87ml裂解液加入1.74mg/ml PMSF50μl）。 2，0.01mol/L PBS（ pH 7.2-7.4）
0.2 mol/L NaH2PO4
19ml 0.2 mol/L Na2HPO4
17g 蒸馏水至
3，G250考马斯亮蓝溶液（测蛋白含量专用）
考马斯亮蓝G250： 100mg
95％乙醇：
配制时，先用乙醇溶解考马斯亮蓝染料，再加入磷酸和水，混匀后，用滤纸过滤，4℃保存。 4，0.15 mol/L NaCl
NaCl（MW58.44）
100 ml 高温灭菌后，室温保存。 5，100mg/ml 牛血清白蛋白（BSA）
0.15 mol/L NaCl
贡献者：doctorcxrwesternbolt试剂配制 - 实验交流 - 生物秀
标题: westernbolt试剂配制
摘要: [westernbolt试剂配制]Western-Blot试剂配制
1 1 11 0mol L
Tris&HCl Tris (MW121 14)30 29g
蒸馏水 200ml
溶解后，用浓盐酸调pH至所需点（见下所示），最后用蒸馏水定容至250ml，高温灭菌后室温下保存。
7 4 约17ml
7 6 约15ml
8 0 约10ml1 1 21 74mg ml (10mmol L)PMSF
PMSF …… [关键词:裂解液 缓冲液 甘氨酸 灭菌 酰胺 电泳]……
Western-Blot配制
1.1.11.0mol/L
Tris (MW121.14)
溶解后，用浓盐酸调pH至所需点（见下所示），最后用蒸馏水定容至250ml，高温灭菌后室温下保存。
1.1.21.74mg/ml (10mmol/L)PMSF
PMSF 0.174g
异丙醇 100ml
溶解后，分装于1.5ml离心管中，-20℃保存。
1.1.3 0.2mol/L NaH2PO4
NaH2PO4（MW119.98） 12g
蒸馏水至 500ml
溶解后，高压灭菌，室温保存。
1.1.4 0.2mol/LNa2HPO4
Na2HPO &12H2O（MW 358.14） 71.6g
蒸馏水至 1000ml
溶解后，高压灭菌，室温保存。
蒸馏水至 100ml
50℃水浴下溶解，室温保存。如在长期保存中出现沉淀，水浴溶化后，仍可使用。
1.1.6 10％过硫酸胺（AP）
过硫酸胺 0.1g
超纯水 1.0ml
溶解后，4℃保存，保存时间为1周。
（可先将过硫酸胺干粉称好分量后放在EP管中，一次性多装几管，使用时加入超纯水即可）
1.1.7 1.5mol/L Tris&HCl（pH8.8）
Tris (MW121.14)
溶解后，用浓盐酸调pH至8.8，最后用超纯水定容至250ml，室温下保存。
1.1.8 0.5mol/L
Tris&HCl（pH6.8）
Tris (MW121.14)
溶解后，用浓盐酸调pH至6.8，最后用超纯水定容至250ml，室温下保存。
1.1.9 40％Acr/Bic（37.5:1）
丙稀酰胺（Acr）
甲叉双丙稀酰胺（Bic） 1g
溶解后4℃保存。使用时恢复至室温且无沉淀。
1.1.10 30％Acr/Bic（29:1）
丙稀酰胺（Acr）
甲叉双丙稀酰胺（Bic） 1g
溶解后4℃保存。使用时恢复至室温且无沉淀。
1.1.11 20％Tween20
混匀后4℃保存。
1.2 使用液配制
1.2.1单去污剂裂解液（PMSF）：
Tris&HCl（pH8.0）2.5ml
TritonX-100
混匀后4℃保存。使用时，加入PMSF至终浓度为100μg/ml（0.87ml裂解液加入1.74mg/ml
PMSF50μl）。
一般实际用的比较多的其实是RIPA-Radio Immunoprecipitation Assay裂解配方：
50 mM Tris-HCl pH 7.4、150 mM NaCl、1 mM PMSF、1 mM EDTA、1% Triton
X-100、1%脱氧胆酸钠、0.1% SDS。
裂解得到的蛋白样品，由于含有较高的蛋白去垢剂干扰，不能用Brandford法测定蛋白浓度,要用BCA蛋白定量盒测定蛋白浓度。
RIPA裂解液的配方有很多种，根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。对于某些特殊蛋白的IP，如果发现Western及IP细胞裂解液(弱)效果不是非常理想，可以尝试用RIPA裂解液(强、中或弱)。如果发现IP的时候背景很高，即非特异的蛋白也被IP下来，则需要选用裂解强度较高的裂解液，例如RIPA裂解液(强或中)。如果发现目的蛋白无法被IP下来，则说明裂解液的强度过强，可以使用较为温和的裂解液例如RIPA裂解液(弱)或NP-40裂解液。对于某些难溶解蛋白的Western，如果发现Western及IP细胞裂解液(弱)效果不是非常理想，可以尝试使用裂解强度更高的裂解液例如RIPA裂解液(强、中)或SDS裂解液。
1.2.20.01mol/L PBS（ pH
0.2 mol/L NaH2PO4
0.2 mol/L Na2HPO4
1.2.3 G250考马斯亮蓝溶液（蛋白定量专用）
考马斯亮蓝G250
蒸馏水至 1000ml
配制时，先用乙醇溶解考马斯亮蓝染料，再加入磷酸和水，混匀后，用滤纸过滤，4℃保存。
1.2.4 0.15 mol/L NaCl
NaCl（MW58.44） 0.877g
高温灭菌后，室温保存。
1.2.5100mg/ml 牛血清白蛋白（BSA）
0.15 mol/L NaCl
溶解后-20℃保存。制作蛋白标准曲线时，用0.15 mol/L NaCl进行100倍稀释成1mg/ml，-20℃保存。
1.2.6还原型5 X SDS上样缓冲液
0.5 mol/L Tris&HCl（pH6.8）
二硫叔糖醇（DTT，MW154.5）
混匀后，分装于1.5ml中，4℃保存。
1.2.7 电泳液缓冲液
Tris（MW121.14）
甘氨酸（MW75.07）
溶解后室温保存，次溶液可重复使用3～5次。
（电泳液可以回收重复利用，一般将回收的电泳液加入垂直电泳槽的下半部分，上半部分最好使用新鲜的电泳缓冲液）
1.2.8 转移缓冲液
甘氨酸（MW75.07）
Tris（MW121.14）
溶解后室温保存，次溶液可重复使用3～5次（次溶液最好保存在4度冰箱，最多使用5次左右，不然影响转移效率）。
（先用蒸馏水溶解甘氨酸、和SDS，然后再加入甲醇，最后补足液体。如果先加入甲醇，溶解甘氨酸、和等比较困难）
1.2.9 10X丽春红染液
磺基水杨酸
使用时将其稀释10倍。
1 mol/L Tris&HCl（pH7.5）
（可以配制成10&TBS进行保存，稀释10倍使用）
1.2.10 TBST缓冲液
20％Tween20
混匀后即可使用，最好现用现配。
1.2.11封闭液
(最好现配现用)
脱脂奶粉或者BSA
相关热词：
生物秀是目前国内最具影响力的生物医药门户网站之一，致力于IT技术和BT的跨界融合以及生物医药领域前沿技术和成功商业模式的传播。为生物医药领域研究人员和企业提供最具价值的行业资讯、专业技术、学术交流平台、会议会展、电子商务和求职招聘等一站式服务。
官方微信号：shengwuxiu
电话：021-western blot失败经验总结_百度文库
两大类热门资源免费畅读
续费一年阅读会员，立省24元！
western blot失败经验总结
上传于||文档简介
阅读已结束，如果下载本文需要使用0下载券
想免费下载更多文档？
下载文档到电脑，查找使用更方便
还剩7页未读，继续阅读
你可能喜欢}