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杆状病毒表达的蛋白，不带任何标签，求纯化过程啊，，
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问题已关闭悬赏丁当:2
从别处获得一蛋白，杆状病毒系统表达的可溶性蛋白，条带大概30KD左右，预测等电点为10，目前是 此蛋白并不带任何标签，但是要求得到纯度在90-95%的蛋白。现在我们尝试了先过分子筛再用离子交换方法，但是并没有得到比较纯的蛋白，请问各位蛋白高手们这种情况该怎么解决啊，，，**，，，
不知道邀请谁？试试他们
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等电点是10 是这个蛋白不带标签纯化的优势，可以在pH7-8的缓冲液里（如Tris）过SP阳离子柱富集，高分辨率阳离子柱精细分离，最后过分子筛。
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如果蛋白没有标签，就要通过离子交换、疏水以及分子筛进行纯化，纯化的第一步不能使用分子筛，因为体积有限制，分子筛上样体积不能超过柱体积的5%，等电点是10的蛋白建议可以先在ph7-8左右进行阳离子交换，之后再进行分子筛纯化。
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杆状病毒标的的可溶性蛋白?是分泌表达的还是胞内可溶性表达呢？楼上说的很对，高等电点是这个蛋白的优势，可以尝试阳离子交换纯化。但是我们这边的杆状病毒表达都是分泌表达的，本身纯度就比较高了，直接浓缩过分子筛就好了。
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很简单，这是变上限积分函数求导。F(x) = x∫_0^x f(t)dt - 2∫_0^x tf(t)dtF&#39;(x)=∫_0^x f(t)dt
+ x[∫_0^x f(t)dt]&#39;- 2[∫_0^x tf(t)dt]&#39;=∫_0^x f(t)dt
+x[f(x)] -2[xf(x)]=∫_0^x f(t)dt
+xf(x) -2xf(x)
采纳率：91%
来自团队：
就是提到积分号前面的是常数
画红线的这一步具体写下好么？麻烦你了
这里看不明白&#128514;
为什么有两个
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